關于二代測序的簡介:
二代測序技術(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測序技術,是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十億個 DNA片段進行測序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測序相比二代測序技術具有高通量、高準確性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢。
二代測序技術在大幅提高了測序速度的同時,大幅度的降低了測序成本,保持了高準確性,以前完成一個人類基因組的測序需要3年時間,而使用二代測序技術則需要1周,但其序列讀長方面比起一代測序技術則要短很多,大多只100bp-150bp。
擴增子測序是二代測序嗎?黑龍江嘉安健達二代測序應用
二代測序的優(yōu)勢和劣勢分別有哪些?
優(yōu)勢:能夠同時得到大量的序列數(shù)據(jù),相比于一代測序技術,通量提高了成千上萬倍;單條序列成本非常低廉。
劣勢:序列讀長較短,Illumina平臺為250-300bp,454平臺也只有500bp左右;由于建庫中利用了PCR富集序列,因此有一些含量較少的序列可能無法被大量擴增,造成一些信息的丟失,且PCR過程中有一定概率會引入錯配堿基。想要得到準確和長度較長的拼接結果,需要測序的覆蓋率較高導致結果錯誤較多和成本增加。 廣東哪里有二代測序二代測序的優(yōu)勢是高通量。
什么樣本可以做二代測序?③
細胞樣本
培養(yǎng)細胞:包括各種原代培養(yǎng)細胞和細胞系。在基礎醫(yī)學研究中,對培養(yǎng)的細胞進行測序可以了解細胞的基因特征和功能變化。例如,在研究細胞信號轉導通路時,對經過特定刺激處理的培養(yǎng)細胞進行轉錄組測序,以分析基因表達的上調或下調情況。
脫落細胞:如痰液中的脫落細胞、尿液中的脫落細胞等。這些細胞可以用于某些疾病的篩查。例如,在肺*篩查中,對痰液中的脫落細胞進行基因檢測,通過二代測序尋找肺*相關的基因突變,作為一種非侵入性的檢測方法。
二代測序技術在不同人群中的準確性有何差異②
遺傳病患者及攜帶者
優(yōu)勢:在常見單基因遺傳病如囊性纖維化、鐮狀細胞貧血等的檢測中,二代測序技術準確性高,能夠快速、準確地找到致病基因,對于有家族遺傳病史的人群,可有效確定是否攜帶致病基因,評估生育患病后代的風險。
局限性:對于罕見遺傳病,由于基因突變的多樣性和復雜性,可能存在部分致病基因未被覆蓋或難以準確解讀的情況,導致準確性有所降低。此外,即使檢測結果為陰性,也不能完全排除患病可能,因部分遺傳病可能由未知基因突變或基因與環(huán)境相互作用引起2 一代和二代測序的區(qū)別?
②二代測序一般多久出結果?
2、測序平臺和通量
不同的二代測序平臺有不同的通量(一次能測序的樣本數(shù)量和數(shù)據(jù)量)和測序速度。一些高通量的測序平臺,如IlluminaNovaSeq系列,能夠在較短時間內產生大量的數(shù)據(jù)。但如果使用的是通量較低的小型測序儀,或者測序儀的運行時間被多個項目分配,都會影響結果產出的時間。例如,在高通量平臺上進行全基因組測序,測序運行時間可能在2-7天左右,具體取決于測序深度等因素。而對于一些小型臺式測序儀進行靶向基因測序,運行時間可能在1-3天。 二代測序的流程有哪些?靜安區(qū)哪里有二代測序流程
二代測序是為了改進一代測序通量過低的問題而出現(xiàn)的。黑龍江嘉安健達二代測序應用
什么樣本可以做二代測序?①
1、血液樣本
全血:這是最常見的樣本類型之一。血液中含有白細胞,其細胞核內有完整的基因組DNA。通過提取白細胞中的DNA,可以進行全基因組測序、全外顯子組測序等。例如,在遺傳病的基因診斷中,抽取患者的全血,提取DNA后,對與疾病相關的基因或整個外顯子組進行測序,以尋找致病突變。
血漿/血清:其中含有游離的DNA(cfDNA)和RNA(cfRNA)。在**患者中,腫瘤細胞會釋放其DNA片段進入血液循環(huán),這些cfDNA被稱為循環(huán)**DNA(ctDNA)。通過對血漿中的ctDNA進行測序,可以實現(xiàn)**的早期篩查、***過程中的動態(tài)監(jiān)測等。例如,對于肺*患者,檢測血漿中的ctDNA來追蹤**的基因突變情況,為靶向***提供依據(jù)。 黑龍江嘉安健達二代測序應用