0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑，下面匯總一下胰酶使用過(guò)程中常見(jiàn)的一些問(wèn)題。

胰酶的使用濃度是多少？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時(shí)間延長(zhǎng)，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長(zhǎng)期保存。胰酶使用的時(shí)候要注意什么？（1）在使用胰酶細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。（2）胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。 胰蛋白酶可以用于原代細(xì)胞的傳代過(guò)程中分散組織。中國(guó)臺(tái)灣EDTA胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)

1、胰酶是，就是說(shuō)PBS,注意，盡量不要用水來(lái)溶，因?yàn)橐３譂B透壓。2、EDTA的工作液溶度是－，根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度自己調(diào)整。EDTA并不是必須的，容易消化的細(xì)胞可不加。EDTA對(duì)細(xì)胞貼壁性有影響，因此使用時(shí)要甚重。如果影響貼壁，但消化時(shí)必須要用，那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，可去除EDTA。如果對(duì)貼壁沒(méi)影響，那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質(zhì)量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意，血清可終止胰酶的作用，但不能終止EDTA的作用，對(duì)有些細(xì)胞來(lái)說(shuō)，終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時(shí)候**易溶解，在配制時(shí)可先滴幾滴NaOH將pH調(diào)至8，注意，胰酶可使溶液變酸，所以要邊溶邊測(cè)pH，隨時(shí)調(diào)整。注意，不可加過(guò)量NaOH，否則過(guò)堿，細(xì)胞會(huì)受不了。6、胰酶EDTA相對(duì)比較難溶，可用磁力攪拌器，或放入4度冰箱過(guò)夜，待溶解后過(guò)濾**。7、可配2－3乘的胰酶，這樣比較節(jié)約時(shí)間和濾器，用的時(shí)候?qū)ι?*PBS即可。8、儲(chǔ)存液放在－20度冰箱凍存，使用液放在4度，用的時(shí)候不要放在27度水浴鍋溫浴，因?yàn)檫@樣會(huì)讓胰酶很快失效，使用前放在室溫下一會(huì)。安徽國(guó)產(chǎn)胰酶哪家好胰酶的使用濃度是多少？

細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶的濃度越高是越好 貼壁細(xì)胞的消化：  常用的消化方法主要有酶消化法、離子螯合劑、物理法和冷凍法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：貼壁干細(xì)胞酶消化傳代時(shí)通常采用兩種方式：1、加入胰酶等干細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；2、加入胰酶后，鏡下觀(guān)察待干細(xì)胞開(kāi)始脫落時(shí)，棄去胰酶，加入培養(yǎng)液并分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)干細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的干細(xì)胞先脫落。

    (含)英文名:(含)儲(chǔ)存條件:-20℃產(chǎn)品簡(jiǎn)介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒(méi)有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過(guò)程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用說(shuō)明(*供參考):1.貼壁細(xì)胞的消化①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,去除殘余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置。(不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同)③顯微鏡下觀(guān)察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀(guān)察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化。⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落。 含EDTA的胰酶消化活力會(huì)比不含EDTA的強(qiáng)。

    在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶(Trypsin)，EDTA等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，破壞細(xì)胞間的連接，從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在℃時(shí)，胰酶的作用能力**強(qiáng)，因此使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為，而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度（）的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+，從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會(huì)加入一定量的EDTA混合使用，以增強(qiáng)解離效果。但是對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí)，推薦選擇不含EDTA的消化液。本產(chǎn)品含有(Trypsin)，溶于無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。為改良型，除了具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點(diǎn)之外，消化時(shí)間更短，消化效果媲美進(jìn)口產(chǎn)品，特別適用于難消化的細(xì)胞。 胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。中國(guó)臺(tái)灣EDTA胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)

胰蛋白酶溶液用于組織和單層細(xì)胞的解離。中國(guó)臺(tái)灣EDTA胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)

    (不含EDTA含酚紅)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無(wú)定形粉末。系從各種動(dòng)物胰臟制取的混合物，主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性，遇酸、堿及熱即喪失活力，水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時(shí)產(chǎn)生沉淀。為助消化藥，用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業(yè)和紡織印染，主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡(jiǎn)介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基，1.不含EDTA含酚紅：含酚紅，（1：250）溶于HBSS溶液，不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含，不含EDTA和酚紅，溶于無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化，通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說(shuō)明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。c)顯微鏡下觀(guān)察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀(guān)察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 中國(guó)臺(tái)灣EDTA胰酶市場(chǎng)報(bào)價(jià)