cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時(shí)的ph都較為穩(wěn)定，在未調(diào)ph的情況下，可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號(hào)馬鈴薯無(wú)菌苗為例，觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至：a、培養(yǎng)基制作方法：隨機(jī)選取超純水，測(cè)得其ph為，用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第二種：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第三種：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第四種：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第五種：1/，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第六種：1/，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第七種：，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第八種：，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至。b、培養(yǎng)方法：從培養(yǎng)實(shí)例4所述培養(yǎng)基獲得長(zhǎng)勢(shì)**的馬鈴薯幼苗，在清水中緩苗2-3d后選取長(zhǎng)勢(shì)一致的馬鈴薯幼苗，如圖9-a所示，置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d，每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間14h、黑暗時(shí)間10h)條件下培養(yǎng)。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。浙江MEM a培養(yǎng)基進(jìn)口

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，培養(yǎng)基在高溫**的過(guò)程中，其營(yíng)養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級(jí)反應(yīng)來(lái)描述其反應(yīng)速度：式中—表示營(yíng)養(yǎng)成分破環(huán)的速率，C：表示營(yíng)養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù)，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù)，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度，k同樣，**過(guò)程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫(xiě)成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過(guò)程實(shí)際上是營(yíng)養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個(gè)平行性反應(yīng)，對(duì)于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高，其兩個(gè)平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加，但增加的幅度（大?。﹨s不同，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實(shí)驗(yàn)證明：營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。云南DMEM/F12培養(yǎng)基價(jià)格減血清培養(yǎng)基減少了血清對(duì)細(xì)胞的影響。

    SLM）低血清培養(yǎng)基添加1％小牛血清在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng)CHO細(xì)胞生產(chǎn)EOP，可提高收液次數(shù)，每次收液表達(dá)量明顯提高。概述無(wú)血清培養(yǎng)基是用來(lái)在無(wú)血清條件下生長(zhǎng)特殊類(lèi)型的細(xì)胞或進(jìn)行專(zhuān)門(mén)應(yīng)用的培養(yǎng)基。一般是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和替代血清的補(bǔ)充因子組成。無(wú)血清培養(yǎng)基中沒(méi)有添加血清，但含有個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。無(wú)血清培養(yǎng)基與無(wú)蛋白培養(yǎng)基的區(qū)別在于培養(yǎng)基中沒(méi)有添加蛋白，但含有一些動(dòng)物或植物來(lái)源成分，如低分子量肽的水解物。還有一種化學(xué)限定培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不含有蛋白、水解產(chǎn)物或未知結(jié)構(gòu)的組分，所有成分均有已知的化學(xué)結(jié)構(gòu)。***：1）未知組分少；2）培養(yǎng)基中不存在血清中的抗體、補(bǔ)體等成分，對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞影響小；3）雜蛋白含量少，生產(chǎn)的產(chǎn)品后期處理較容易，例如*苗生產(chǎn)由于人用*苗需要純化減少雜蛋白，純化過(guò)程中成本消耗很大，*苗的損失也很大；4）無(wú)血清培養(yǎng)既可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液的利用率，可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)減少了人力消耗。缺點(diǎn)：目前為止不是所有的細(xì)胞都能在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)。無(wú)血清培養(yǎng)基的某些組分價(jià)格昂貴，導(dǎo)致無(wú)血清無(wú)法工業(yè)推廣的主要原因。

    實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組3選用發(fā)酵中期添加琥珀酸，此時(shí)，菌體增殖放緩，以產(chǎn)酸為主，琥珀酸對(duì)三羧酸循環(huán)有正向促進(jìn)作用，而對(duì)乙醛酸循環(huán)途徑起**作用，從而導(dǎo)致谷氨酸產(chǎn)量的增加；梯度試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，琥珀酸添加量過(guò)**于10g/l），并不會(huì)對(duì)谷氨酸產(chǎn)量帶來(lái)進(jìn)一步的提升，綜合成本考慮，選擇低于10g/l的添加量較為合適。對(duì)照組2和實(shí)驗(yàn)組在發(fā)酵中后期添加殼聚糖，能夠改變細(xì)胞壁的通透性，促進(jìn)谷氨酸分泌到胞外，從而提升谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率；但是殼聚糖添加量（超過(guò)100mg/l）過(guò)大會(huì)導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象發(fā)生，進(jìn)而造成菌株死亡。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，或在實(shí)施案例之外的樹(shù)種實(shí)施本方法，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改，改進(jìn)或范圍的擴(kuò)大，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞培養(yǎng)的重復(fù)性和可靠性。

    無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基的應(yīng)用三、細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法澄清度水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取，細(xì)胞才能生長(zhǎng)增殖，因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項(xiàng)目是通過(guò)對(duì)水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查，判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行。pH值哺乳類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度，pH過(guò)高或者過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品，用注射用水（水溫20℃-30℃）溶解至1L，加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中，用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行；加入規(guī)定量的碳酸氫鈉（見(jiàn)表4-12）到上述溶液中，按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)細(xì)胞培養(yǎng)基具有吸濕性，在空氣中放置水分會(huì)很快升**燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑，其豐富的營(yíng)養(yǎng)成分有利于微生物生長(zhǎng)，控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖，保持細(xì)胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)，支持細(xì)胞增殖。西藏DMEM高糖培養(yǎng)基包括

減血清培養(yǎng)基在減少實(shí)驗(yàn)誤差方面表現(xiàn)出色。浙江MEM a培養(yǎng)基進(jìn)口

    這些重組蛋白和動(dòng)物來(lái)源成分對(duì)生物制品的安全性有很大影響。成本低。主要用途應(yīng)用案例采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM（SLM）低血清培養(yǎng)基分別培養(yǎng)Vero細(xì)胞、BHK21細(xì)胞和CHO細(xì)胞，新生牛血清用量可以從10％降至3％，減少新生牛血清使用批次和批間差的影響，減少生物制品純化損失，減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來(lái)干擾和差異的風(fēng)險(xiǎn)，提高制品安全性。低血清培養(yǎng)基可以在方瓶、3L轉(zhuǎn)瓶、15L轉(zhuǎn)瓶及生物反應(yīng)器中培養(yǎng)細(xì)胞，在*苗生產(chǎn)中可以達(dá)到低血清高密度的培養(yǎng)效果。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，易使細(xì)胞增殖迅速，代謝旺盛，代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有不良影響，易產(chǎn)生細(xì)胞老化脫落現(xiàn)象。因此需要適當(dāng)增加換液次數(shù)，增加傳代頻率。獲取同樣的細(xì)胞量，用低血清培養(yǎng)基將比用傳統(tǒng)培養(yǎng)基縮短近1/3的時(shí)間，可提高生產(chǎn)效率。采用199(SLM)低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細(xì)胞分泌狂犬*苗病毒，滴度明顯高于采用199培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基BHK21細(xì)胞，在本實(shí)驗(yàn)情況下12代內(nèi)細(xì)胞形態(tài)和致密度均優(yōu)于MEM培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)情況，因而可以預(yù)期其產(chǎn)生的口蹄*、甲肝等*苗生產(chǎn)的病毒產(chǎn)量將提高。低血清培養(yǎng)基用于反應(yīng)器Vero細(xì)胞狂犬*苗的生產(chǎn)，實(shí)踐證明效果良好。采DMEM。浙江MEM a培養(yǎng)基進(jìn)口