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廣東重組胰酶

來源: 發(fā)布時間:2024-11-27

    胰蛋白酶:(Trypsin)為蛋白酶的一種,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品計算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力**強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對細胞的作用。有些細胞容易消化(如雞胚原代成纖維細胞)可用胰酶進行消化,可以不加EDTA。 胰酶可在-20℃下保存一年。廣東重組胰酶

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    胰蛋白酶用法用量1.每次~5mg,用蒸餾水5~10ml溶解。2.一般應用:1次5000單位,每日1次肌注,用量酌情而定。為防止疼痛,可加適量普魯卡因。局部用*視情而定,可配成溶液制劑(~,微堿性時活性**強)、噴霧劑、粉劑、油膏等,用作體腔內注射、患部注射、噴霧、濕敷、涂搽等。3.治蛇毒:取注射用結晶胰蛋白酶2000單位1~3支,加~(或注射用水)4~20ml稀釋,以牙痕為中心,在傷口周圍作浸潤注射,或在腫脹部位上方作環(huán)狀封閉1~2次。如病情需要可重復使用。若傷肢腫脹明顯,可于注射本品30分鐘后,切開傷口排毒減壓(嚴重出血者例外),也可在腫脹部位針刺排毒。如傷口已壞死、潰爛,可用其***胰蛋白酶注意事項1.不可作靜注。用前需作劃痕試驗,應注意可能產生過敏反應。2.吸取注射液后應另換針頭,以免注射時疼痛。3.外用時,可采用注射用制劑以緩沖液溶解,但必須在3小時內用畢。胰蛋白酶不良反應:1.注射局部疼痛、硬結。2.本品可引起組胺釋放,產生全身反應,有寒戰(zhàn)、發(fā)熱、***、頭暈、胸痛、***、皮疹、血管神經性水腫、呼吸困難、眼壓升高、白細胞減少等。癥狀輕時不影響繼續(xù)***,給予抗組胺*和對癥*物即可控制,嚴重時應即停*。3.本品偶可致過敏性休克。廣東重組胰酶EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。

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0.25%胰酶是細胞生物學中常用的一種生物試劑,下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少?胰酶濃度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么?(1)在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。(2)胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。

    在253nm的波長處測定吸光度,必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調節(jié),使吸光度在~,作為底物溶液。制成后應在2小時內使用。供試品溶液的制備精密稱取本品適量,加~60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液,加μl,混勻,作為空白。另取供試品溶液200μl,加底物溶液(恒溫于℃±℃),立即計時,混勻,使比色池內的溫度保持在25℃±℃,照紫外-可見分光光度法(2010年版*典二部附錄ⅣA),在253nm的波長處,每隔30秒鐘讀取吸光度,共5分鐘。以吸光度為縱坐標,時間為橫坐標,作圖;每30秒鐘吸光度的改變應恒定在~,呈線性關系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求,應調整供試品溶液的濃度,再作測定。在上述吸光度對時間的關系圖中,取成直線部分的吸光度,按下式計算:式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量,單位;A1為直線上終止的吸光度;A2為直線上開始的吸光度;T為A1至A2讀數的時間,分;W為測定液中含供試品的量,mg;,吸光度每分鐘改變,即相當于1個胰蛋白酶單位。胰蛋白酶制劑注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的醫(yī)學檢查胰蛋白酶檢查名稱胰蛋白酶胰蛋白酶分類血液生化檢查>酶類測定胰蛋白酶胰蛋白酶的測定原理同酶速率法測定。胰蛋白酶消化液都由已經過豬細小病毒檢測和支原體檢測的原料制備。

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    一、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗簡介:EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需的EDTA是乙二胺四乙酸,一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性,因此在使用胰蛋白酶消化液時應添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需材料及試劑:PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗步驟:1.磷酸酶的質量/體積比為%,即將。注意,盡量不要用水溶解,因為必須保持滲透壓。%%,可根據細胞消化的難度進行調整。不需要EDTA,可以省略易于消化的細胞。EDTA對細胞粘附有影響,因此應大量使用。如果影響粘附,則必須將其用于消化,在用完全培養(yǎng)基終止消化后,離心并棄去上清液,然后添加完全培養(yǎng)基以進行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力,則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意,血清可以阻止血漿酶的作用,但不能阻止EDTA。對于某些細胞,有必要在消化后停止離心。5.當pH約為8時,磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中,您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調整為8。請注意,磷酸酶會使溶液變酸,因此您應隨時溶解時測量pH值。調整。請注意,不應添加過量的氫氧化鈉,否則電池將無法承受堿的作用。EDTA是一種化學螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。黑龍江進口胰酶報價

消化液經過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。廣東重組胰酶

    (含)英文名:(含)儲存條件:-20℃產品簡介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質水解為肽,進而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數貼壁細胞。使用說明(*供參考):1.貼壁細胞的消化①吸除培養(yǎng)液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,去除殘余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過細胞即可,室溫放置。(不同的細胞消化時間有所不同)③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用***吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。④如果發(fā)現消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化。⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落。 廣東重組胰酶

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