胰蛋白酶：（Trypsin）為蛋白酶的一種，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品計算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在pH為、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力**強。使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。終止消化時，可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對細胞的作用。有些細胞容易消化（如雞胚原代成纖維細胞）可用胰酶進行消化，可以不加EDTA。 胰蛋白酶是一種動物源性產(chǎn)品，是培養(yǎng)細胞過程中常用的酶。江蘇EDTA胰酶采購

    產(chǎn)品簡介產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價格C0201胰酶細胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。該消化液經(jīng)過過濾**，可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些**的消化。本胰酶細胞消化液具有方便快速的特點，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。包裝清單：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細胞消化液100ml―說明書1份保存條件：4℃保存，一年有效。注意事項：在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和**，請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明使用說明：1.貼壁細胞的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。c)顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用***吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足。江蘇胰酶市場報價含EDTA的胰酶消化活力會比不含EDTA的強。

胰酶操作步驟：

(*供參考) ：1. 吸取培養(yǎng)基，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液，略蓋過細胞即可。根據(jù)細胞的特性可以增加或減少胰酶用量，室溫放置30秒至2分鐘。（不同的細胞消化時間有所不同）3. 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用***吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。

0.25%胰酶是細胞生物學中常用的一種生物試劑，下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么？（1）在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。（2）胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 胰蛋白酶消化液都由已經(jīng)過豬細小病毒檢測和支原體檢測的原料制備。

    在253nm的波長處測定吸光度，必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)，使吸光度在～，作為底物溶液。制成后應(yīng)在2小時內(nèi)使用。供試品溶液的制備精密稱取本品適量，加～60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液，加μl，混勻，作為空白。另取供試品溶液200μl，加底物溶液（恒溫于℃±℃），立即計時，混勻，使比色池內(nèi)的溫度保持在25℃±℃，照紫外－可見分光光度法（2010年版*典二部附錄ⅣA），在253nm的波長處，每隔30秒鐘讀取吸光度，共5分鐘。以吸光度為縱坐標，時間為橫坐標，作圖；每30秒鐘吸光度的改變應(yīng)恒定在～，呈線性關(guān)系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求，應(yīng)調(diào)整供試品溶液的濃度，再作測定。在上述吸光度對時間的關(guān)系圖中，取成直線部分的吸光度，按下式計算：式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量，單位；A1為直線上終止的吸光度；A2為直線上開始的吸光度；T為A1至A2讀數(shù)的時間，分；W為測定液中含供試品的量，mg；，吸光度每分鐘改變，即相當于1個胰蛋白酶單位。胰蛋白酶制劑注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的醫(yī)學檢查胰蛋白酶檢查名稱胰蛋白酶胰蛋白酶分類血液生化檢查>酶類測定胰蛋白酶胰蛋白酶的測定原理同酶速率法測定。使用胰酶細胞消化液(不含EDTA)的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。江蘇胰酶市場報價

消化使用的胰酶是含EDTA還是不含的？江蘇EDTA胰酶采購

    一、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗簡介：EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需的EDTA是乙二胺四乙酸，一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結(jié)合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性，因此在使用胰蛋白酶消化液時應(yīng)添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需材料及試劑：PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗步驟：1.磷酸酶的質(zhì)量/體積比為％，即將。注意，盡量不要用水溶解，因為必須保持滲透壓。％％，可根據(jù)細胞消化的難度進行調(diào)整。不需要EDTA，可以省略易于消化的細胞。EDTA對細胞粘附有影響，因此應(yīng)大量使用。如果影響粘附，則必須將其用于消化，在用完全培養(yǎng)基終止消化后，離心并棄去上清液，然后添加完全培養(yǎng)基以進行培養(yǎng)以除去EDTA。如果不影響附著力，則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意，血清可以阻止血漿酶的作用，但不能阻止EDTA。對于某些細胞，有必要在消化后停止離心。5.當pH約為8時，磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中，您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調(diào)整為8。請注意，磷酸酶會使溶液變酸，因此您應(yīng)隨時溶解時測量pH值。調(diào)整。請注意，不應(yīng)添加過量的氫氧化鈉，否則電池將無法承受堿的作用。江蘇EDTA胰酶采購