平衡鹽溶液維持體外細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生理完整性。平衡鹽溶液是等滲緩沖系統(tǒng),有助于將哺乳動(dòng)物細(xì)胞保持在生理pH范圍內(nèi),并在短期培養(yǎng)期間保持高活力。平衡鹽溶液的主要功能使維持pH和滲透壓平衡,為細(xì)胞提供水分和必需無(wú)機(jī)離子。平衡鹽溶液有多種不同的配方和形式。PBS 與 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液,是生物學(xué)研究中常用的試劑,用于維持 pH 值,同時(shí)可大幅度地減少活細(xì)胞中的滲透壓休克;然而,與 PBS 相比,DPBS 還包括氯化鉀,配方中可含或不含鈣和鎂以及含或不含葡萄糖和**酸。根據(jù)您的具體應(yīng)用選擇 PBS 或 DPBS。平衡鹽溶液PBS不含鈣和鎂,用于在細(xì)胞解離前從培養(yǎng)物中沖洗螯合劑。內(nèi)蒙古無(wú)酚紅平衡鹽溶液
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(簡(jiǎn)稱pH7.2PBS)。1.PBS貯存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml雙蒸水中。2.PBS應(yīng)用液配法取貯存液50ml加雙蒸水450m1即成,經(jīng)103kPa(121.3℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆谩3鲜鋈N常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無(wú)鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗滌細(xì)胞(可防止抑制酶活性和致細(xì)胞凝聚等)。其成分見(jiàn)表1-5,配制方法可參照上述幾種平衡鹽溶液的方法進(jìn)行。內(nèi)蒙古無(wú)酚紅平衡鹽溶液平衡鹽溶液HBSS 由微生物學(xué)家 John Hanks 在1940年配制,富含碳酸氫根離子。
目前**常用的BSS是Hanks液、Earle液和PBS等。(一)BSS的配制要求1.要防止鈣的沉淀BSS配制時(shí)應(yīng)將其中的CaCl2單獨(dú)配制,并將平衡鹽溶液配成濃縮液,使其在稀釋前不讓Ca2+與P042-和C032-接觸,以免產(chǎn)生不溶解的CaP04和CaCO3。避開(kāi)產(chǎn)生CaC03的辦法是將NaHC03單獨(dú)配制,用法時(shí)現(xiàn)加。2.要有良好的緩沖作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。因此應(yīng)將瓶蓋(橡皮塞)蓋緊,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。pH調(diào)整液?jiǎn)为?dú)滅菌時(shí),亦應(yīng)將瓶蓋塞緊,臨時(shí)不用的可凍存,否則NaHC03受熱分解為NaOH和C02,失去其調(diào)整pH之功能。(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和削減有關(guān)成分的化學(xué)反應(yīng),此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲(chǔ)存液(母液)?,F(xiàn)以l0×為例,將其配制辦法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·7H202gCaCl2(含2H20者)待徹低溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑Na2HP04(含12H2O者)KH2P04l0g50ml待徹低溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500ml。、等量用三蒸水稀釋10倍,即成用法液。用前高壓滅菌。例如配制1000m1Hanks用法液。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,平衡鹽溶液(BSS)扮演著至關(guān)重要的角色,它們主要用于維持細(xì)胞的生理環(huán)境和功能。平衡鹽溶液的主要功能包括維持pH和滲透壓平衡,為細(xì)胞提供必需的無(wú)機(jī)離子和水分。這些溶液通常具有等滲性質(zhì),有助于將哺乳動(dòng)物細(xì)胞保持在生理pH范圍內(nèi),并在短期培養(yǎng)期間保持高活力。?Gibco平衡鹽溶液?是一種常用的平衡鹽溶液,它是一個(gè)等滲緩沖系統(tǒng),有多種不同的配方和形式。平衡鹽溶液在**的cGMP和ISO認(rèn)證設(shè)施中生產(chǎn),保持出色質(zhì)量和一致性,以獲得可重復(fù)的結(jié)果。定期測(cè)試包括滲透壓、pH值、穩(wěn)定性,以及針對(duì)內(nèi)***、細(xì)菌和***污染的測(cè)試。?Hanks'平衡鹽溶液(HBSS)?是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的平衡鹽溶液之一,適用于各種細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,如細(xì)胞解離前的清洗、運(yùn)輸細(xì)胞或組織樣品、稀釋細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和制備試劑等。HBSS的改良方式包括不含酚紅,適用于對(duì)酚紅敏感的實(shí)驗(yàn)。?PBS(磷酸鹽緩沖液)?和DPBS(無(wú)鈣鎂磷酸鹽緩沖液)也是常用的平衡鹽溶液,用于維持pH值同時(shí)大幅度地減少活細(xì)胞中的滲透壓休克。PBS和DPBS的區(qū)別在于是否包含鈣和鎂離子、葡萄糖和**酸等成分,根據(jù)具體應(yīng)用選擇合適的溶液。?HEPES緩沖液?和TBS(Tris緩沖鹽水)等其他類型的平衡鹽溶液。 平衡鹽溶液它可以保護(hù)細(xì)胞免受pH波動(dòng)的影響,平衡細(xì)胞膜的滲透壓。
細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液——PBS/DPBS。內(nèi)蒙古無(wú)酚紅平衡鹽溶液
PB和PBS緩沖液的主要區(qū)別在于成分和應(yīng)用領(lǐng)域。??12?PB(磷酸鹽緩沖液)?是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉按一定比例混合而成的緩沖液,主要用于維持化學(xué)反應(yīng)、合成反應(yīng)等化學(xué)領(lǐng)域的pH環(huán)境。它是**普通的緩沖溶液,用于維持一定的pH環(huán)境。?PBS(磷酸鹽緩沖生理鹽水)?則是在PB的基礎(chǔ)上加入了氯化鈉(NaCl),形成了磷酸鹽緩沖生理鹽水。PBS不僅具有良好的緩沖作用,還具有很好的鹽平衡能力,可以調(diào)節(jié)滲透壓,維持穩(wěn)定的pH和滲透壓,提供必要的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境。PBS廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)研究中,作為溶劑使用,保護(hù)試劑的活性。簡(jiǎn)而言之,PB側(cè)重于化學(xué)領(lǐng)域的pH維持,而PBS則在生物化學(xué)研究中提供了更接近生理?xiàng)l件的緩沖和滲透壓調(diào)節(jié),適用于細(xì)胞培養(yǎng)、分子克隆等生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。內(nèi)蒙古無(wú)酚紅平衡鹽溶液