胰蛋白酶：（Trypsin）為蛋白酶的一種，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。由223個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多肽，主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品計(jì)算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。有些細(xì)胞容易消化（如雞胚原代成纖維細(xì)胞）可用胰酶進(jìn)行消化，可以不加EDTA。 胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。吉林重組胰酶是什么

胰蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品加工、制藥、生化檢測(cè)和制革等多種行業(yè)。在制藥工業(yè)中，胰蛋白酶可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸，以達(dá)到***的目的。胰蛋白酶生物藥用于***呼吸道疾病，可以溶解黏痰和膿性痰，還可以***毒蛇咬傷等。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會(huì)消化正常組織，而能分解膿性痰等黏性分泌物，促進(jìn)***、化療藥物向病灶滲透。在食品工業(yè)中，胰蛋白酶主要用于水解價(jià)值較高的動(dòng)植物性蛋白等，以牛乳為例，利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原，能生產(chǎn)低敏配方奶粉。在制革工業(yè)中，胰蛋白酶用于皮革脫灰軟化，也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的膠原蛋白。[1]吉林重組胰酶是什么適用于貼壁細(xì)胞的消化傳代；也可用于組織細(xì)胞分離的初步消化。

胰酶的作用原理是什么呢？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈，通過(guò)在特定位置上降解蛋白，使細(xì)胞膜上和培養(yǎng)皿結(jié)合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時(shí)細(xì)胞在自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力的作用下成為球形。使用胰酶時(shí)需注意哪些細(xì)節(jié)問題？在使用胰酶（Trypsins）細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差，做流式時(shí)的CDMarker也可能會(huì)下降。胰酶進(jìn)行分裝時(shí)盡量分裝成多瓶，并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰４鏁r(shí)液體體積會(huì)膨脹，多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并可能造成污染。胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞，如胚胎、上皮、肝、腎等組織，但對(duì)于纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。

    胰蛋白酶試劑同酶速率法測(cè)定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法測(cè)定。胰蛋白酶正常值（1）RIA法：陰性。（2）酶速率法（37℃）：十二指腸液：150～600μg/ml胰蛋白酶化驗(yàn)結(jié)果臨床意義（1）升高：急性胰腺、慢性胰腺（復(fù)發(fā)期）、胰腺*、腎功能不全等。（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺后期）。胰蛋白酶附注急性胰腺時(shí)血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍，一般在10～15天**正常。胰蛋白酶相關(guān)疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品說(shuō)明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶為肽鏈內(nèi)切酶，對(duì)精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用，可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會(huì)消化正常**，而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物，能促進(jìn)***、化療*物向病灶滲透。胰蛋白酶適應(yīng)證1.用于膿胸、血胸、外科癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、婁管等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫、膿腫。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。3.用于***毒蛇咬傷，曾試用于竹葉青、銀環(huán)蛇、眼鏡蛇、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800余例，均獲***。胰蛋白酶禁忌證1.肝腎出血、出血傾向及結(jié)核性膿腫患者禁用。2.不可用于急性癥及出血空腔中。胰酶4℃保存，一年有效；-20℃可保存更長(zhǎng)時(shí)間。

    使**或細(xì)胞片分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。影響消化速度的因素較多，主要有胰酶溶液的活性（配制條件、凍存或4℃保存時(shí)間長(zhǎng)短、是否反復(fù)凍融、化凍后存放時(shí)間及溫度等）、消化時(shí)的溫度（氣溫、細(xì)胞培養(yǎng)瓶及胰酶溶液的溫度）以及所加胰酶溶液的多少等。加入胰蛋白酶-EDTA溶液，視細(xì)胞瓶的大小加入體積為2ml或更多（依培養(yǎng)器皿的大小而定），以使充分浸潤(rùn)；一般消化時(shí)間約為1至3分鐘，肉眼觀察瓶底由半透明（細(xì)胞單層連接成片）轉(zhuǎn)為透明、點(diǎn)狀（出現(xiàn)細(xì)小空隙）時(shí)，棄去細(xì)胞消化液，或看見培養(yǎng)瓶壁呈白茫狀即可。并加入適量的完全培養(yǎng)液終止消化，吹打分散；如見大量細(xì)胞片狀脫落，已消化過(guò)頭，則不能頃倒消化液而直接進(jìn)行下一步操作。（消化過(guò)頭，可造成大量細(xì)胞從瓶壁上脫下，甚至造成細(xì)胞破碎。由于血清含有非特異性胰蛋白酶抑制劑，所以加入完全培養(yǎng)基可以終止反應(yīng)。胰酶配置方法：1、培養(yǎng)液配制，方便好用，對(duì)細(xì)胞影響小，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2、生理鹽水配制，要先調(diào)ph值（①胰酶（1：250）克②EDTA-Na③NaCl④KCl⑤Glucose⑥PhenolRed⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時(shí)，調(diào)pH，過(guò)濾**。）3、pbs（：稱取胰酶粉末。胰酶用0.05%還是0.25%的？需不需要含酚紅的？山西EDTA胰酶進(jìn)口

消化液經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化。吉林重組胰酶是什么

    (不含EDTA含酚紅)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無(wú)定形粉末。系從各種動(dòng)物胰臟制取的混合物，主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性，遇酸、堿及熱即喪失活力，水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時(shí)產(chǎn)生沉淀。為助消化藥，用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業(yè)和紡織印染，主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經(jīng)***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡(jiǎn)介(不含EDTA含酚紅)為細(xì)胞培養(yǎng)基，1.不含EDTA含酚紅：含酚紅，（1：250）溶于HBSS溶液，不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含，不含EDTA和酚紅，溶于無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化，通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說(shuō)明---貼壁細(xì)胞Chemicalbook的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。c)顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化。 吉林重組胰酶是什么