培養(yǎng)基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基（必要時佩戴口罩或在通風柜中操作，以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末），先加入適量的水，充分混合（注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊），然后加水至所需的量后適當加熱，并重復或連續(xù)攪拌使其快速分散，必要時應完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意：培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應重新制備。脫水培養(yǎng)基，又稱預制干燥培養(yǎng)基，指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。進口培養(yǎng)基制備器定制

培養(yǎng)基的配制：1、配料：在容器中加入少量水，按照配方稱取各種藥品，加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。2、溶解：淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀，加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調(diào)PH：用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4、過濾：濾紙或棉花進行過濾。5、分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶：若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，較多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。(2)試管分裝：液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養(yǎng)成分會被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。新疆培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動物生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。

培養(yǎng)基制備基本方法：培養(yǎng)基各成份的混合和溶化，培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。很好使用不銹鋼鍋加熱溶化，也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，必須加以補足。

天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期，體外培養(yǎng)細胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。較廣使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。血清種類：目用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細胞的原因：來源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化：培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。

在制備培養(yǎng)基時，通常要考慮以下因素：(1)pH值多數(shù)細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小，但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4～7.7，轉(zhuǎn)化細胞以pH=7.0～7.4更合適。據(jù)報道，上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值，做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑，pH=7.4呈紅色，pH=7.0變橙色，pH=6.5變黃色，而pH=7.6呈紅色中略帶藍色，pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性，因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣，放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用，因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍，一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基，可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：溫度探頭測量培養(yǎng)基實際溫度，控溫很準。寧夏培養(yǎng)基制備器

全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：保證細菌不被引入容器中。進口培養(yǎng)基制備器定制

固體斜面培養(yǎng)基配制步驟：1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規(guī)定進行配制外，一般均應盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄：每次制備培養(yǎng)基均應有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱取：培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，較好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。進口培養(yǎng)基制備器定制