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蘇州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠價(jià)格

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-16

真核生物的基因組 DNA 以染色質(zhì)(Chromatin)的形式存在。因此,研究蛋白質(zhì)與 DNA 在染色質(zhì)環(huán)境中的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑,而染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技術(shù)是目前公認(rèn)的研究此相互作用的選擇,是真核生物基因表達(dá)機(jī)制研究中不可或缺的技術(shù)之一。
它的基本原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下,固定蛋白質(zhì)-DNA(染色質(zhì))復(fù)合物,并將其切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過(guò)免疫學(xué)方法(抗體親和)沉淀此復(fù)合體,特異性地富集目的蛋白結(jié)合的 DNA,通過(guò)對(duì)目的片段的純化與后期檢測(cè),從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA 相互作用的信息。
免疫沉淀技術(shù)的綜述。蘇州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠價(jià)格

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    免疫沉淀(immunoprecipitation)是指利用抗體可與抗原特異性結(jié)合的特性,將抗原(常為靶蛋白)從混合體系沉淀下來(lái),初步分離靶蛋白的一種方法。免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一種在體外探測(cè)兩個(gè)蛋白分子間是否存在特異性相互作用的一種方法。其原理非常簡(jiǎn)單,如果兩個(gè)蛋白在體外體系能夠發(fā)生特異性相互作用的話,那么當(dāng)用一種蛋白的抗體進(jìn)行免疫沉淀時(shí),另一個(gè)蛋白也會(huì)被同時(shí)沉淀下來(lái)。與酵母雙雜交技術(shù)不同,免疫共沉淀技術(shù)所利用的是抗原和抗體間的免疫反應(yīng),是一種基于體外非細(xì)胞的環(huán)境中研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用的方法。 南京蛋白免疫沉淀磁珠哪個(gè)公司好用免疫沉淀ChIP抗體的選擇?

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免疫沉淀純化所得抗原純度低一般有多種原因:
1. 非特異性蛋白污染
如果洗脫所得抗原純度較低,則有幾種方法可以進(jìn)行優(yōu)化。在結(jié)合或洗滌緩沖液中加入去污劑或其他可以降低非特異性結(jié)合的組分。使用普通微珠預(yù)純化樣本還可以降低非目標(biāo)分子的共純化。此外,還可以使用無(wú)關(guān)蛋白 (如BSA) 封閉微珠 。
2. 抗體污染
使用蛋白A、G或A/G的經(jīng)典免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)抗體與抗原共洗脫的情況。如果共洗脫會(huì)影響下游分析,則需要使用抗體通過(guò)共價(jià)連接固定至微珠的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如Pierce 直接 IP 或交聯(lián) IP 的形式。

免疫沉淀技術(shù)(Immunoprecipitation,簡(jiǎn)稱IP)是一種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,用于從細(xì)胞或組織裂解物中分離和純化特定蛋白質(zhì)。這項(xiàng)技術(shù)依賴于抗體的高度特異性,通過(guò)抗體與目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的富集和純化。
具體操作步驟通常包括以下幾個(gè)階段:裂解細(xì)胞或組織,抗體與蛋白質(zhì)結(jié)合,固相支持物的使用,免疫復(fù)合物的捕獲,洗滌,洗脫分析。
免疫沉淀技術(shù)不僅可以用于檢測(cè)蛋白質(zhì)的存在和量,還可以用于研究蛋白質(zhì)的翻譯后修飾、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性以及蛋白質(zhì)的功能等。此外,免疫沉淀技術(shù)是許多其他高級(jí)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的基礎(chǔ),如染色質(zhì)免疫沉淀測(cè)序(ChIP-Seq)和蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)分析等。
免疫沉淀技術(shù)RIP的優(yōu)缺點(diǎn)是什么?

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免疫沉淀技術(shù)(Immunoprecipitation, IP)是一種用于研究蛋白質(zhì)相互作用和蛋白質(zhì)特性的重要方法。它具有一些明顯的優(yōu)點(diǎn),但也存在一些局限性。
優(yōu)點(diǎn):
1. 特異性強(qiáng):IP技術(shù)利用特異性抗體對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行捕獲,因此具有很高的特異性。
2. 富集低豐度蛋白:可以從小量樣本中富集低豐度的目標(biāo)蛋白,有助于研究稀有蛋白。
3. 研究蛋白質(zhì)相互作用:通過(guò)Co-IP等變體技術(shù),可以研究蛋白質(zhì)之間的相互作用。
4. 操作簡(jiǎn)便:IP實(shí)驗(yàn)步驟相對(duì)簡(jiǎn)單,容易在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)施。

缺點(diǎn):
1. 對(duì)抗體質(zhì)量依賴性高:需要高質(zhì)量的特異性抗體,否則可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或?qū)嶒?yàn)失敗。
2. 存在非特異性結(jié)合:樣本中的其他蛋白質(zhì)可能非特異性地結(jié)合到抗體或固相載體上。
3. 可能破壞蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象:裂解和洗滌步驟可能破壞蛋白質(zhì)的天然結(jié)構(gòu),影響其功能。
4. 可能存在背景噪聲:非特異性結(jié)合可能導(dǎo)致背景噪聲,影響結(jié)果的清晰度和解釋。

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免疫沉淀技術(shù)ChIP是什么?蘇州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠價(jià)格

免疫沉淀技術(shù)(Immunoprecipitation, IP)是一種用于研究蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)復(fù)合物組成以及特定蛋白質(zhì)的表達(dá)和純化的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
基本原理
免疫沉淀技術(shù)基于抗體與特定蛋白質(zhì)(抗原)之間的特異性相互作用。通過(guò)使用針對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的特異性抗體,可以從含有多種蛋白質(zhì)的復(fù)雜樣本中捕獲并富集目標(biāo)蛋白質(zhì)。
免疫沉淀技術(shù)有多種類(lèi)型,包括:
1. 個(gè)別免疫沉淀法(Individual IP)
2. 免疫共沉淀法(Co-IP)
3. 染色質(zhì)免疫沉淀法(ChIP)
4. RNA免疫沉淀法(RIP)
近年來(lái),免疫沉淀技術(shù)在固相支持物的選擇上有了很大進(jìn)步。磁性微珠因其操作簡(jiǎn)便、快速和自動(dòng)化程度高而逐漸取代了傳統(tǒng)的瓊脂糖樹(shù)脂。
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