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熒光染料在細(xì)胞內(nèi)離子濃度測(cè)量中起著至關(guān)重要的作用,不同種類的熒光染料在測(cè)量細(xì)胞內(nèi)離子濃度時(shí)存在多方面的具體差異。以下將從多個(gè)角度進(jìn)行詳細(xì)闡述。一、測(cè)量的離子種類不同鈣敏感熒光染料:文獻(xiàn)0提到“Calciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion”,即鈣敏感熒光指示劑是**常被研究的離子之一。這類染料主要用于測(cè)量細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度。例如在實(shí)驗(yàn)中,將細(xì)胞注入鈣敏感熒光染料后,在高倍顯微鏡下觀察,通過(guò)過(guò)濾特定帶寬的照明光激發(fā)染料分子,使其發(fā)出熒光,從而測(cè)量鈣離子濃度1。氫離子敏感熒光染料:在一些研究中,也有用于測(cè)量細(xì)胞內(nèi)氫離子濃度的熒光染料。文獻(xiàn)10提到“該系統(tǒng)使用1μm的pH敏感熒光染料涂層磁性納米顆粒進(jìn)行了細(xì)胞內(nèi)pH定位”,這里的pH敏感熒光染料就是用于測(cè)量氫離子濃度的,通過(guò)這種染料可以確定細(xì)胞內(nèi)的pH值,進(jìn)而反映氫離子濃度的變化11。通過(guò)神經(jīng)鞘的電泳標(biāo)記神經(jīng)元群體機(jī)制。廣西熒光染料熒光素鉀鹽
在聚合物納米顆粒中的穩(wěn)定性:量子點(diǎn)被提議作為穩(wěn)定的熒光標(biāo)記,并與其他有機(jī)染料(尼羅紅和DiI)在聚合物納米顆粒中的包封、在不同水性或親脂性介質(zhì)中的擴(kuò)散以及光穩(wěn)定性方面進(jìn)行了比較1015。體外轉(zhuǎn)移到親水PBS溶液中顯示,8小時(shí)后,量子點(diǎn)、尼羅紅和DiI納米顆粒分別釋放出4.2±2.2%、15.5±2.0%和0.9±0.02%。然而,在親脂性介質(zhì)中鏈甘油三酯和人工皮脂中,所有使用的染料都觀察到更高的擴(kuò)散速率。三種不同標(biāo)記物的熒光強(qiáng)度在24小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。連續(xù)激光束照射使用共聚焦激光掃描顯微鏡表明,量子點(diǎn)比其他有機(jī)染料具有更高的穩(wěn)定性。這表明在不同的環(huán)境中,不同化學(xué)結(jié)構(gòu)的熒光染料穩(wěn)定性存在差異。在分散熒光染料色漿中的穩(wěn)定性:以苯并吡喃類分散熒光染料和萘磺酸類陰離子分散劑為原料,通過(guò)濕磨法制備分散熒光染料色漿。甘肅納米熒光染料不同結(jié)構(gòu)修飾的噁嗪衍生物熒光染料在熒光發(fā)射特性、神經(jīng)靶向性和臨床應(yīng)用前景等方面存在著一定的差異。
近紅外熒光成像:一些熒光染料在近紅外區(qū)域發(fā)射熒光,具有組織穿透能力強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。例如,苯并吩噻嗪類近紅外光敏劑通過(guò)***溶酶體-膜破壞途徑,利用PDT輻射產(chǎn)生的超氧化物(Ⅰ型)和1O2(Ⅱ型)來(lái)消融腫瘤細(xì)胞。該系列光敏劑ET-NB-C12在體外和體內(nèi)*****中表現(xiàn)出突出的***性能29?;谌麃?lái)昔布和苯并吩噁嗪的近紅外發(fā)射(700nm)熒光探針(NB-C6-CCB),在COX-2高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞或組織中發(fā)射出近紅外熒光,用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)高爾基體中COX-2酶29。光控開(kāi)關(guān)與藥物釋放檢測(cè):設(shè)計(jì)的***藥物遞送系統(tǒng),以NaYF4:Yb3+,Tm3+上轉(zhuǎn)換納米晶為熒光源,并將其用靜電紡絲的方式摻雜在介孔二氧化硅纖維中。通過(guò)低溫氧化處理保留了纖維的出色的熒光性能和柔性,并在載藥后的纖維的孔洞處加裝光控開(kāi)關(guān)。通過(guò)二次載藥,使得纖維可以載有更多的抗**藥品。與傳統(tǒng)藥物遞送系統(tǒng)相比,該載藥系統(tǒng)可在近紅外光控制下釋放藥物,并且利用FRET原理,實(shí)時(shí)的檢測(cè)藥物釋放量。
生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域在細(xì)胞熒光成像中,近紅外氧雜蒽熒光染料可用于細(xì)胞熒光染色成像,如熒光染料NXD-3具有良好的細(xì)胞線粒體靶向熒光標(biāo)記效果5。通過(guò)特定的熒光染料可以對(duì)細(xì)胞內(nèi)的特定結(jié)構(gòu)進(jìn)行標(biāo)記,有助于研究人員觀察細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能。高分辨率熔解分析(HRM)中,不同的DNA結(jié)合熒光染料可用于PCR擴(kuò)增和熔解曲線分析等。例如,SYTO16和SYTO13在多數(shù)檢測(cè)中性能與商業(yè)HRM染料相當(dāng),適用于實(shí)時(shí)PCR和HRM應(yīng)用1418。二、化學(xué)領(lǐng)域?yàn)榭疾煨》肿优浠c不同核酸結(jié)構(gòu)的結(jié)合機(jī)理,發(fā)展新的核酸探針?lè)肿?,合成了一種新型一次甲基不對(duì)稱菁染料(MTP)。MTP可作為熒光探針?lè)肿佑糜趨^(qū)別不同結(jié)構(gòu)的核酸分子,其與平行和混合平行G-四鏈體DNA結(jié)合較強(qiáng),與單/雙鏈DNA作用較弱,與反平行G-四鏈體DNA作用**弱11。新型BODIPY類熒光染料可用于檢測(cè)大氣污染物苯硫酚和硒代半胱氨酸,還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)的苯硫酚進(jìn)行檢測(cè),具有重要的生物應(yīng)用前景。熒光染料作為一種重要的科研和應(yīng)用工具,近年來(lái)得到了廣泛的關(guān)注和研究。
DiI染料標(biāo)記機(jī)制DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanineperchlorate)是一種親脂性的熒光染料,常用于神經(jīng)元標(biāo)記。在大鼠中,通過(guò)結(jié)晶狀的熒光DiI可以對(duì)牙初級(jí)傳入神經(jīng)元(DPANs)進(jìn)行逆行熒光標(biāo)記。在小鼠中,雖然也可以使用DiI進(jìn)行標(biāo)記,但之前*能使用Fluoro-Gold這種具有神經(jīng)毒性的熒光染料,且其膜穿透特性優(yōu)于碳菁染料。后來(lái)研究人員對(duì)DiI在大鼠中的標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行了重新評(píng)估,旨在將其應(yīng)用于小鼠。新型的DiI配方具有改進(jìn)的穿透性能和染色效率,可以評(píng)估軸突染料從應(yīng)用部位到三叉神經(jīng)節(jié)的運(yùn)輸速度、染色的DPANs數(shù)量以及熒光強(qiáng)度。其標(biāo)記機(jī)制主要是利用DiI的親脂性,能夠與神經(jīng)元細(xì)胞膜結(jié)合,隨著軸突的運(yùn)輸而擴(kuò)散到神經(jīng)元的各個(gè)部位,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)神經(jīng)元的標(biāo)記。熒光染料在動(dòng)物成像中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。熒光染料Fluor 647
動(dòng)物成像技術(shù)在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。廣西熒光染料熒光素鉀鹽
腫瘤細(xì)胞成像:近紅外熒光染料IR-780具備使多種腎透明細(xì)胞*細(xì)胞顯像的能力,對(duì)正常腎胚上皮細(xì)胞則無(wú)此能力,可用于血液中腎透明細(xì)胞*細(xì)胞的特異性診斷。這為腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)和診斷提供了新的方法21。疾病標(biāo)志物檢測(cè):設(shè)計(jì)合成的近紅外熒光探針RB-Phenylacrylate(NOF1),用于高選擇性和高靈敏度檢測(cè)半胱氨酸(Cys),并成功應(yīng)用于活細(xì)胞、斑馬魚(yú)和小鼠中半胱氨酸的近紅外熒光成像檢測(cè)。近紅外熒光探針RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于過(guò)氧亞硝酸根的熒光成像,實(shí)現(xiàn)了活細(xì)胞和小鼠炎癥模型中ONOO?的熒光成像檢測(cè)。這些探針為疾病標(biāo)志物的檢測(cè)和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近紅外氧雜蒽熒光染料如KRhs,可用于超分辨率成像。KRhs顯示出強(qiáng)烈的近紅外發(fā)射峰,在700nm處具有高熒光量子產(chǎn)率,且在沒(méi)有增強(qiáng)緩沖液的幫助下,表現(xiàn)出隨機(jī)熒光開(kāi)關(guān)特性,支持單熒光團(tuán)的時(shí)間分辨定位。KRhs被功能化為KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo,分別具有線粒體、質(zhì)膜和融合蛋白靶向能力,可用于活細(xì)胞中這些目標(biāo)的超分辨率成像20。廣西熒光染料熒光素鉀鹽