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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-22

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為了證明檢測(cè)極低濃度的可能診斷價(jià)值使用數(shù)字ELISA檢測(cè)血液中的蛋白質(zhì),對(duì)接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測(cè)量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測(cè)住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測(cè)方法的檢測(cè)限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測(cè)這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測(cè)前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會(huì)被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾單分子ELISA檢測(cè)盒,使用靈活開(kāi)放,少于8孔即可測(cè)試,可使用客戶自研各用試劑!代理數(shù)字ELISA廠家

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    創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個(gè)病毒顆粒,相當(dāng)于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開(kāi)發(fā)能夠測(cè)量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標(biāo)記復(fù)制,11,12或測(cè)量整體、結(jié)合標(biāo)記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標(biāo)記物,已將蛋白質(zhì)的檢測(cè)范圍擴(kuò)展至低飛摩爾水平;更近使用該技術(shù)的一篇報(bào)道展示了檢測(cè)到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達(dá)到的靈敏度然而,檢測(cè)蛋白質(zhì)仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測(cè)到6,19。單個(gè)蛋白質(zhì)分子的分離和檢測(cè)為測(cè)量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 單分子技術(shù)數(shù)字ELISA多重檢測(cè)新型的單分子檢測(cè)方法的普及版;

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我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。

在前列腺切除術(shù)后患者中,能夠準(zhǔn)確量化PSA水平的能力,即使在非常低的濃度(<300fM或10pg/mL)下,也應(yīng)提供如果PSA水平升高,早期提示復(fù)發(fā)17,29。圖4顯示PSA水平使用數(shù)字ELISA在30名接受治理性前列腺切除術(shù)且術(shù)后至少6周采集血液的患者血清中進(jìn)行測(cè)量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商業(yè)檢測(cè)限采用PSA數(shù)字ELISA(圖3A)對(duì)全血清樣本進(jìn)行稀釋1:4后測(cè)定,成功檢測(cè)到所有30例患者中PSA,濃度范圍為14fg/mL至9.4pg/mL,平均濃度為1.5pg/mL。需要進(jìn)一步的臨床研究來(lái)確定在RP患者中測(cè)量PSAfg/mL水平的診斷益處。

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通過(guò)在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測(cè)單個(gè)免疫復(fù)合物,實(shí)現(xiàn)數(shù)字ELISA已使在亞細(xì)胞水平上測(cè)量血清中臨床重要的蛋白質(zhì)成為可能飛摩爾濃度。我們認(rèn)為,與之前報(bào)道的方法相比,數(shù)字ELISA表現(xiàn)出的不敏感性改善將轉(zhuǎn)化為診斷上的好處。例如,在本研究中測(cè)定的30個(gè)RP樣品中有9個(gè)樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標(biāo)簽的先前比較高靈敏度PSA測(cè)定的LOD17。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA, 極速檢測(cè),快15min能完成 的ELISA檢測(cè)!

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    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱(chēng)之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來(lái)檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無(wú)法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬(wàn)種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。 代理數(shù)字ELISA廠家

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