二代測序應用于蛋白組測序的常見方式②?
結合質(zhì)譜技術的聯(lián)合分析
原理:質(zhì)譜技術是目前蛋白組學中鑒定和分析蛋白質(zhì)的**技術。它可以將蛋白質(zhì)酶解成肽段后進行離子化,然后根據(jù)不同肽段在質(zhì)譜儀中的質(zhì)荷比等特征來確定肽段的序列,進而推導出蛋白質(zhì)的序列信息。二代測序在這里的作用是輔助質(zhì)譜分析,比如對樣本進行轉錄組測序,獲得基因序列信息,幫助構建蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫。當質(zhì)譜檢測到肽段后,可以基于這個參考數(shù)據(jù)庫更精細地匹配和鑒定出對應的蛋白質(zhì),同時也有助于分析蛋白質(zhì)的可變剪接產(chǎn)生的異構體等復雜情況。
應用案例:在**研究中,獲取**組織和相鄰正常組織樣本。先通過二代測序構建該組織對應的轉錄組序列數(shù)據(jù)庫,然后利用質(zhì)譜分析**組織中的蛋白,借助之前構建的數(shù)據(jù)庫,能夠準確鑒定出許多在**中特異性表達或表達量發(fā)生***變化的蛋白質(zhì),進一步研究這些蛋白質(zhì)在**發(fā)***展中的作用,像發(fā)現(xiàn)某些參與細胞信號轉導通路的蛋白出現(xiàn)異常表達,可能與腫瘤細胞的增殖、轉移等特性相關。 二代測序需要分析嗎?湖北嘉安健達二代測序價格
WES測序的局限性
無法檢測非外顯子區(qū)域的變異:對于發(fā)生在非外顯子區(qū)域,如內(nèi)含子、基因間區(qū)等的調(diào)控元件或結構變異可能無法檢測到,而這些區(qū)域的變異也可能與疾病的發(fā)***展有關。
對復雜疾病的解釋有限:復雜疾病通常是由多個基因和環(huán)境因素共同作用導致的,WES 測序雖然可以檢測到基因變異,但對于這些變異如何相互作用以及與環(huán)境因素的關系難以***解釋。
數(shù)據(jù)分析和解讀難度大:盡管 WES 測序的數(shù)據(jù)量相對全基因組測序較小,但仍然需要專業(yè)的生物信息學知識和技能進行分析和解讀,且對于一些罕見的變異或新發(fā)現(xiàn)的基因變異,其臨床意義的解讀可能存在困難。 長寧區(qū)二代測序流程二代測序又可以稱之為什么?
常見的二代測序平臺有哪些?
一、Illumina系列
NovaSeq系列:通量高,可產(chǎn)出大量測序數(shù)據(jù),適用于大規(guī)?;蚪M測序、轉錄組測序等項目,能滿足科研和臨床對高通量數(shù)據(jù)的需求,如NovaSeq6000,其S2試劑可實現(xiàn)PE50/PE100/PE150測序,產(chǎn)出1.2T/flowcell.
HiSeq系列:包括HiSeqXten、HiSeq等型號,不同型號在通量、讀長和應用場景上有所差異,如HiSeqXten的PE150測序可達到120G/lane,常用于人類基因組重測序等項目.
MiSeqDesktopSystem:是桌面型測序系統(tǒng),通量相對較低,但操作簡便、快速,適合小型實驗室或特定的小規(guī)模測序項目,如針對特定基因的測序研究.
二代測序—全外顯子測序的局限性不能檢測所有的遺傳變異:它只能檢測外顯子區(qū)域的變異,對于非外顯子區(qū)域(如內(nèi)含子、基因間區(qū)域)的變異無法檢測,而這些區(qū)域的某些變異也可能對基因的表達和功能產(chǎn)生重要影響,如內(nèi)含子中的突變可能影響基因的剪接。數(shù)據(jù)分析復雜:全外顯子測序會產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),需要復雜的生物信息學工具和方法來進行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、變異的檢測和注釋、致病性的評估等多個環(huán)節(jié),其中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導致錯誤的結論。二代測序可以邊合成邊測序嗎?
二代測序—全外顯子測序的優(yōu)勢針對性強:它主要聚焦于基因組中編碼蛋白質(zhì)的區(qū)域,這部分區(qū)域雖然只占整個基因組的1-2%左右,但包含了大部分與疾病相關的突變。例如,在研究孟德爾遺傳病時,很多致病突變都位于外顯子區(qū)域,通過全外顯子測序可以更高效地找到這些突變。成本效益高:相比于全基因組測序,全外顯子測序的成本相對較低。因為它不需要對整個基因組(包括大量的非編碼區(qū)域)進行測序,在一定程度上減少了數(shù)據(jù)量和測序成本,同時又能獲取大部分有重要功能意義的遺傳信息。二代測序使用的是哪種設備?陜西嘉安健達二代測序運用
二代測序廣泛應用于個性化醫(yī)學。湖北嘉安健達二代測序價格
二代測序——比較基因組分析(針對多個微生物基因組):
共線性分析:比較不同微生物基因組之間基因的排列順序和位置關系。例如,在親緣關系較近的細菌菌株之間,大部分基因的排列順序可能是相似的,但可能會有一些基因的插入、缺失或者易位等現(xiàn)象。通過分析共線性,可以了解微生物在進化過程中的基因組結構變化。
基因家族分析:確定不同微生物基因組中存在的基因家族?;蚣易迨怯梢唤M具有相似序列和功能的基因組成。例如,在微生物的耐藥基因家族中,不同成員可能具有不同程度的耐藥性相關功能。通過分析基因家族的擴張和收縮情況,可以了解微生物對環(huán)境壓力(如***使用)的適應策略。
單核苷酸多態(tài)性(SNP)分析:在重測序項目中,SNP分析是很重要的一部分。SNP是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。通過分析SNP,可以了解微生物在不同環(huán)境或者不同宿主中的遺傳變異情況。例如,在研究傳染病病原體的傳播過程中,SNP分析可以追蹤病原體在不同患者之間的傳播路徑。 湖北嘉安健達二代測序價格