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遼寧嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-01-18

什么是chip-seq?

Chip-seq即染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序(ChromatinImmunoprecipitationSequencing),是一種結(jié)合染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)技術(shù)與高通量測(cè)序(NGS)的分子生物學(xué)技術(shù),可在全基因組范圍內(nèi)檢測(cè)與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等相互作用的DNA區(qū)段。以下是具體介紹:

技術(shù)原理

染色質(zhì)固定:使用甲醛等試劑交聯(lián)細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和DNA,使蛋白-DNA相互作用的復(fù)合物固定,從而保留它們?cè)隗w內(nèi)的結(jié)合狀態(tài)。

染色質(zhì)片段化:采用超聲波或酶切的方法將染色質(zhì)剪切成適合測(cè)序的小片段,通常片段大小在200-500bp范圍內(nèi)。免疫共沉淀:利用特異性抗體富集與目標(biāo)蛋白結(jié)合的DNA片段,通過(guò)抗體與目標(biāo)蛋白的特異性結(jié)合,將蛋白-DNA復(fù)合物沉淀下來(lái)。

交聯(lián)逆轉(zhuǎn)與DNA提?。和ㄟ^(guò)加熱或化學(xué)方法逆轉(zhuǎn)蛋白-DNA交聯(lián),使DNA與蛋白質(zhì)分離,然后提取并純化DNA。

文庫(kù)構(gòu)建與高通量測(cè)序:對(duì)純化的DNA片段進(jìn)行測(cè)序文庫(kù)制備,在DNA片段兩端連接特定的寡核苷酸接頭,隨后在高通量測(cè)序平臺(tái)上進(jìn)行測(cè)序。

數(shù)據(jù)分析:包括序列比對(duì),將測(cè)序讀段映射到參考基因組;峰值調(diào)用,識(shí)別蛋白質(zhì)結(jié)合的富集區(qū)域;功能注釋,分析峰的位置和功能等。 二代測(cè)序的流程有哪些?遼寧嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

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二代測(cè)序用于蛋白組測(cè)序的發(fā)展前景?

多組學(xué)整合更緊密:未來(lái)二代測(cè)序與蛋白組測(cè)序會(huì)和其他組學(xué)技術(shù)(如代謝組學(xué)、表觀基因組學(xué)等)進(jìn)一步深度整合,從多個(gè)層面***地解析生命活動(dòng)分子機(jī)制,例如在疾病研究中,綜合分析基因轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)表達(dá)及代謝產(chǎn)物變化等,為疾病的早期診斷、精細(xì)***提供更完善的依據(jù)。

技術(shù)優(yōu)化提升準(zhǔn)確性:一方面,二代測(cè)序技術(shù)自身會(huì)不斷改進(jìn),提高測(cè)序的準(zhǔn)確性、降低錯(cuò)誤率,并且在通量上可能進(jìn)一步提升;另一方面,和蛋白組測(cè)序銜接的相關(guān)流程和分析方法也會(huì)不斷優(yōu)化,從而更精細(xì)地從轉(zhuǎn)錄組信息轉(zhuǎn)化為可靠的蛋白組信息,推動(dòng)蛋白組測(cè)序領(lǐng)域的發(fā)展。 江西嘉安健達(dá)二代測(cè)序原理單細(xì)胞測(cè)序?qū)儆诙鷾y(cè)序嗎?

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常見的二代測(cè)序類型①

全基因組測(cè)序(WGS):對(duì)生物體整個(gè)基因組進(jìn)行測(cè)序,涵蓋所有基因、非編碼區(qū)域、調(diào)控區(qū)域等。能***檢測(cè)基因組變異,但數(shù)據(jù)量和成本較高,適用于復(fù)雜疾病研究、物種進(jìn)化分析等.

全外顯子組測(cè)序(WES):針對(duì)基因組中全部外顯子區(qū)域測(cè)序,可快速鑒定基因突變,性價(jià)比高,常用于遺傳病診斷、**基因突變檢測(cè)等,助力發(fā)現(xiàn)致病基因和潛在***靶點(diǎn).

轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-Seq):對(duì)特定細(xì)胞或組織在特定狀態(tài)下的 RNA 轉(zhuǎn)錄情況測(cè)序,包括 mRNA、lncRNA、miRNA 等,可檢測(cè)基因表達(dá)水平、剪接變異、可變剪接等信息,用于基因表達(dá)調(diào)控研究、疾病標(biāo)志物篩選、藥物研發(fā)等.

轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的主要測(cè)序?qū)ο蟀ㄒ韵聨最悾ㄏ拢?

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA):lncRNA長(zhǎng)度較長(zhǎng),具有多種生物學(xué)功能,如參與基因表達(dá)調(diào)控、染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)等。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序有助于發(fā)現(xiàn)和鑒定新的lncRNA,并分析其在不同組織和細(xì)胞中的表達(dá)模式及功能機(jī)制。其他RNA

環(huán)狀RNA(circRNA):circRNA是一類特殊的非編碼RNA,呈環(huán)狀結(jié)構(gòu),具有穩(wěn)定性高、不易被降解等特點(diǎn)。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以檢測(cè)circRNA的存在和表達(dá)水平,研究其在基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及疾病發(fā)***展中的作用。

小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA):snRNA主要參與真核生物mRNA的加工過(guò)程,如mRNA的剪接等;snoRNA則主要參與rRNA的加工和修飾。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以對(duì)它們的表達(dá)和功能進(jìn)行研究,以揭示其在細(xì)胞內(nèi)的作用機(jī)制。 二代測(cè)序廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研發(fā)。

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二代測(cè)序用于蛋白組測(cè)序的優(yōu)勢(shì)

高通量:二代測(cè)序本身具有一次性處理大量核酸序列的能力,在結(jié)合蛋白組測(cè)序相關(guān)應(yīng)用時(shí),能快速獲取大規(guī)模的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),進(jìn)而可以對(duì)眾多潛在的蛋白質(zhì)信息進(jìn)行分析推斷,相比傳統(tǒng)逐個(gè)蛋白分析的方法,**提高了效率,能夠在短時(shí)間內(nèi)覆蓋更***的蛋白組范圍。

能發(fā)現(xiàn)新蛋白及異構(gòu)體:借助對(duì)轉(zhuǎn)錄組的深度測(cè)序,可以挖掘出一些新的轉(zhuǎn)錄本,這些轉(zhuǎn)錄本有可能翻譯出全新的蛋白質(zhì)或者產(chǎn)生蛋白質(zhì)異構(gòu)體,有助于拓展對(duì)蛋白組復(fù)雜程度的認(rèn)知,發(fā)現(xiàn)那些以往可能被遺漏的蛋白質(zhì)種類和形式。 二代測(cè)序的使用場(chǎng)景都有哪些?江西哪里有二代測(cè)序運(yùn)用

二代測(cè)序?qū)嶒?yàn)與測(cè)序原理是什么?遼寧嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

不同二代測(cè)序技術(shù)平臺(tái)的速度Illumina測(cè)序平臺(tái):這是目前市場(chǎng)上應(yīng)用較為***的二代測(cè)序平臺(tái)之一,其測(cè)序速度較快。例如IlluminaNovaSeq系列,一次運(yùn)行可以在1-3天內(nèi)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),通量可達(dá)數(shù)億甚至數(shù)十億條讀長(zhǎng),能夠滿足大規(guī)?;蚪M學(xué)研究和臨床檢測(cè)的需求。Roche454測(cè)序平臺(tái):Roche454測(cè)序系統(tǒng)的測(cè)序速度也較快,其特點(diǎn)是測(cè)序片段比較長(zhǎng),高質(zhì)量的讀長(zhǎng)能達(dá)到400bp左右,一次運(yùn)行可以在24小時(shí)左右完成對(duì)一定數(shù)量樣本的測(cè)序。BGISEQ系列:華大智造的BGISEQ系列測(cè)序儀在速度上也有出色表現(xiàn),如全球二代測(cè)序速度**快設(shè)備E25量產(chǎn),為快速測(cè)序提供了有力支持遼寧嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用

標(biāo)簽: 二代測(cè)序
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