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如何挑選適合細(xì)胞生長的血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存血清:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。深圳優(yōu)級血清哪里有
胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國外起步較早,認(rèn)識也較深入。應(yīng)該說,胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢。因為其營養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長,每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時,要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細(xì)胞的生長和狀態(tài)。深圳優(yōu)級血清哪里有血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁。
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。深圳優(yōu)級血清哪里有
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛。深圳優(yōu)級血清哪里有
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加完全。國產(chǎn)血清因為原料供應(yīng)等原因,通常會選8個月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎牛血清。但我們知道這時血清里的生長因子已經(jīng)完全不同于胚胎發(fā)育時的生長因子。甚至于現(xiàn)在很多國產(chǎn)廠家已經(jīng)把這類血清完全歸類于胎牛血清,貼上胎牛血清的標(biāo)簽,賣著胎牛價格,卻只起著新生牛的作用。市場上進(jìn)口胎牛血清較多,真正好的胎牛血清并不多。深圳優(yōu)級血清哪里有
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