胎牛血清的主要成分:蛋白質類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉鐵蛋白(能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進細胞增殖的效應;氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導細胞發(fā)生分化的作用。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。上海OriCell胎牛血清銷售公司
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質量?目測法,我們可根據血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據血清蛋白含量的不同,可表現出黃色或者紅色。進口血清質量較為好的呈現出淡黃、微紅色,較差質量呈現出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當的,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡。國產血清絕大多數為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。上海OriCell胎牛血清銷售公司一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾。
非正規(guī)胎牛血清的產品會存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質檢使胎牛血清存在生物學污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導致采集的原血放置時間過長或操作不當導致溶血,血液中血細胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內產物,里面很多物質都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數據的真實性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進行加工生產,為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進行處理,較為常見的是添加、轉鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學實驗都有巨大的影響。
血清的安全風險因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產地的流行病學趨勢、基礎設施情況以及血源供應量。措施得當可以預防能避免的動物疾病,同時產地國穩(wěn)定可靠的基礎設施,對保證供應鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應。生產,生產遵循cGMP指南,則可保證血清質量,降低有關無菌過濾、摻加和標簽錯誤的風險。cGMP為現場審核的開展提供了框架。生產過程中對血清進行有效的無菌過濾也是十分重要的。產品質控,有效的無菌過濾使得細菌污染的風險很低。對于支原體和病毒篩查,一些相關規(guī)范內部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時使得要篩查的病毒種類無需太多。有效輻照,要進一步降低外源因子風險,可對血清進行輻照(25–40 kGy)。但輻照并不能保證病毒污染的完全去除。輻照過量會導致FBS效能下降。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。胎牛血清的蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。上海OriCell胎牛血清銷售公司
含抗體的血清可作為預防或醫(yī)治疾病之用。上海OriCell胎牛血清銷售公司
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。上海OriCell胎牛血清銷售公司