避免產(chǎn)生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。蕪湖標準胎牛血清多少錢
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。蕪湖標準胎牛血清多少錢胎牛血清是品質(zhì)高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較為少。
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調(diào)變它們所結合的物質(zhì)活力。有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,XP建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預防措施與建議:因此不立即使用的血清應保存在-20℃或以下。新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛。
胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細微差異即可決定成敗的細胞培養(yǎng)技術來說,選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產(chǎn)的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導致的,另一方面也受到過度使用的影響。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。武漢細胞培養(yǎng)用胎牛血清哪里有賣
血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚。蕪湖標準胎牛血清多少錢
胎牛血清用于細胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細胞培養(yǎng)技術的方面,國外起步較早,認識也較深入。應該說,胎牛血清在細胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢。因為其營養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細胞生長,每種細胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時,要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細胞的生長和狀態(tài)。蕪湖標準胎牛血清多少錢