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蛋白質(zhì)純化注意事項:在進行任何一種蛋白質(zhì)純化的時候,都要時刻注意維護它的穩(wěn)定性,保護它的活性,有一些通用的注意事項需要牢記,它們包括:1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內(nèi)進行。2、不要太稀,蛋白濃度維持在μg/mL~mg/mL。3、合適的pH,除非是進行聚焦層析,所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同,防止蛋白質(zhì)的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑,防止蛋白酶對目標蛋白的降解;在純化細胞中的蛋白質(zhì)時,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA對蛋白的污染。5、避免樣品反復(fù)凍融和劇烈攪動,以防蛋白質(zhì)的變性。6、緩沖溶液成分盡量模擬細胞內(nèi)環(huán)境。7、在緩沖溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫蘇糖醇)(或β-巰基乙醇),防止蛋白質(zhì)的氧化。8、加1~10mmol/LEDTA金屬螯合劑,防止重金屬對目標蛋白的破壞。9、使用滅菌溶液,防止微生物生長。 ;選試劑上海楚知生物分子生物酶的種類。作用。江西定制試劑銷售價格
蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:HA標簽是人流感血凝素的第98-106氨基酸序列YPYDVPDYA,對外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小,容易構(gòu)建成標簽蛋白融合到蛋白N端或者C端,因此常被用于重組蛋白的融合表達。Anti-HAAntibody能夠特異性識別HA標簽,從而用于融合蛋白的表達和定位檢測??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):HA標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融-上海楚知生物上海核酸提取試劑規(guī)格純化糖蛋白,膜蛋白,糖脂,多糖,脂蛋白等。
上海楚知生物蛋白純化試劑產(chǎn)品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結(jié)構(gòu)域,該蛋白在正常機體發(fā)育和**發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個重要的轉(zhuǎn)錄因子,其異常表達能促進多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對目的蛋白進行準確的檢測、定位和純化??贵w來源:小鼠交叉反應(yīng):c-Myc標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融
生物試劑試劑的取用規(guī)則 , 固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時,可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準確稱量時,則用稱量瓶在天平上進行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的比較低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。 如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時應(yīng)注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 為了達到準確的實驗結(jié)果,取用試劑時應(yīng)遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì): (1)試劑不能與手接觸。 (2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,***不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。 (3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。 (4)已取出的試不能再放回原試劑瓶內(nèi)。 另外取用試劑時應(yīng)本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實驗結(jié)果.一步純化或者去除纖維結(jié)合蛋白。
蛋白純化試劑Ni Smart Beads純化流程2/3常州天地人和生物科技有限公司平衡液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,pH7.4洗雜液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,0-5mM咪唑,pH7.4洗脫液:20mM磷酸鹽,0.5MNaCl,250mM咪唑,pH7.4注:為了減少宿主細胞蛋白的洗脫,建議在洗雜液中加入低濃度的咪唑。為了消除一些離子作用蛋白的吸附,可以在溶液中加入0.5M-1.0MNaCl??梢圆捎玫蚿H值洗脫或與咪唑結(jié)合,如pH2.5-5.0。2.2樣品準備1)將細胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心杯,7,000rpm(7,500×g),離心15min取上清。如果使用預(yù)裝柱,樣品在使用前比較好用0.22μm或者0.45μm濾膜過濾除菌。2)樣品中含有可耐受范圍內(nèi)試劑,不需要透析或濃縮,可以直接上樣。2.3樣品純化流程1)將NiSmartBeads裝入合適的層析柱,層析用5倍柱體積的平衡液進行平衡,使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護蛋白的作用。2)將樣品加到平衡好的NiSmartBeads中,保證目的蛋白與Ni2+充分接觸,提高目的蛋白的回收率,收集流出液。3)用10-15倍柱體積的洗雜液進行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,收集洗雜液。4)使用5-10倍柱體積的洗脫液,收集洗脫液,即目的蛋白組分。質(zhì)粒抽提試劑盒Plasmid Purification MaxiPrep Kit。上海核酸提取試劑規(guī)格
谷胱甘肽親和純化介質(zhì)。江西定制試劑銷售價格
金屬螯合親合層析,是一種新型的應(yīng)用于原**白純化的技術(shù)。該方法通過蛋白質(zhì)表面的一些特殊的氨基酸,使之與金屬離子發(fā)生相互作用,從而對蛋白質(zhì)進行親和純化。這些作用包括配價鍵結(jié)合、靜電吸附、共價鍵結(jié)合等,其中以6個組氨酸殘基組合的融合標簽(His-Tag)在原**白表達中的應(yīng)用**為***。His-Tag可結(jié)合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的結(jié)構(gòu),以便于進行下一步的純化及檢測。由于金屬螯合親合層析具有配體簡單、吸附量大、分離條件溫和、通用性強等特點,所以可選擇范圍廣,高鹽,存在變性劑以及去垢劑的上樣條件下進行純化,His-Tag正逐漸成為分離純化蛋白質(zhì)等生物工程產(chǎn)品***的技術(shù)之一。選試劑到楚知江西定制試劑銷售價格
上海楚知生物科技有限公司位于上海市松江區(qū)淶坊路1000號新虹橋企業(yè)天地919室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團隊。上海楚知生物是上海楚知生物科技有限公司的主營品牌,是專業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢,化學(xué)試劑(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品),實驗室設(shè)備(除醫(yī)療器械),辦公家具,計算機、軟件及輔助設(shè)備(除計算機信息系統(tǒng)安全**產(chǎn)品),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化學(xué)品)銷售。 【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】公司,擁有自己**的技術(shù)體系。公司不僅*提供專業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢,化學(xué)試劑(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品),實驗室設(shè)備(除醫(yī)療器械),辦公家具,計算機、軟件及輔助設(shè)備(除計算機信息系統(tǒng)安全**產(chǎn)品),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化學(xué)品)銷售。 【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】,同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。上海楚知生物始終以質(zhì)量為發(fā)展,把顧客的滿意作為公司發(fā)展的動力,致力于為顧客帶來***的知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動物發(fā)光成像,ATS高壓均質(zhì)機。