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上海FabRICATORIdeS蛋白酶抗體酶切

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-13

與IdeS不同,Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級(jí)分析,從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過(guò)程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級(jí)表征和質(zhì)量控制;快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F(ab')2和Fc片段;高度特異性–人IgM重鏈中的一個(gè)消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長(zhǎng),則不存在過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為5.5至9.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為38kDa。用 Genovis的GlySERIAS Immobilized消化Romiplostim,產(chǎn)生均質(zhì)的 Fc/2。上海FabRICATORIdeS蛋白酶抗體酶切

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Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對(duì)處理兔IgG感興趣,請(qǐng)聯(lián)系Genovis團(tuán)隊(duì),我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡(jiǎn)單性、速度和可重復(fù)性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應(yīng)用。 QC方法需要執(zhí)行簡(jiǎn)單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因?yàn)樗m用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進(jìn)行QC工作的客戶將能夠在未來(lái)的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。河北GlySERIASIdeS蛋白酶Genovis的GingisREX (RgpB)可用于肽圖分析、從頭肽測(cè)序和翻譯后修飾分析;產(chǎn)生更長(zhǎng)的肽 - 提高序列覆蓋率。

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IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1,而 IgASAP Sub1+2 同時(shí)消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。為了獲得純和完整的Fab片段,使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進(jìn)行人IgG1的消化和抗體片段的后續(xù)純化。通過(guò)與 GingisKHAN 孵育,然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化,在曲妥珠單抗上證明了完整的片段生成。樣品的酶和Fc部分存在于色譜柱的流通中,F(xiàn)ab很容易通過(guò)降低pH洗脫。使用該試劑盒,可以制備 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段。Genovis同時(shí)提供IdeS酶的純化試劑盒。

Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對(duì)許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進(jìn)一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過(guò)蛋白-蛋白相互作用與目標(biāo)抗體工作,這說(shuō)明了它的高特異性。事實(shí)上,它在單個(gè)位點(diǎn)消化意味著使用FabRICATOR時(shí)沒有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn),其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺(tái)方法應(yīng)用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來(lái)獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發(fā)揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應(yīng)用。Genovis發(fā)現(xiàn)大部分緩沖液與FabRICATOR活性兼容,已經(jīng)測(cè)試了PBS和150mM 醋酸銨 pH7,也適用于FabRICATOR HPLC。

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當(dāng)你應(yīng)用像肽圖這樣的方法時(shí),你可以從Genovis中級(jí)方法中獲得的信息量就沒有那么多了。一個(gè)主要的區(qū)別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個(gè)氨基酸。然而,中級(jí)分析比肽圖譜具有快速和簡(jiǎn)單的巨大優(yōu)勢(shì),因?yàn)樾枰治龅纳V峰要少得多,數(shù)據(jù)處理任務(wù)要簡(jiǎn)單得多。此外,在中級(jí)實(shí)驗(yàn)中,手工實(shí)驗(yàn)步驟要少得多,F(xiàn)abALACTICA(IdeS)酶切消化方法不需要針對(duì)不同的人體IgG1進(jìn)行優(yōu)化。一旦在氨基酸水平上進(jìn)行了PTM表征,我們非常認(rèn)為中級(jí)表征肽圖的一種補(bǔ)充方法,可以在更常規(guī)的基礎(chǔ)上應(yīng)用。中級(jí)分析更適用于高通量或監(jiān)測(cè)類型的方法,并可用于支持肽圖分析。在大多數(shù)IgG上,您可以在短短30分鐘內(nèi)生成F(ab’)2和Fc/2片段。湖南IdeS蛋白酶抗體酶切

孵育時(shí)間為過(guò)夜(16-18小時(shí)),并且由于酶的特異性,沒有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。上海FabRICATORIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨(dú)特的酶,可在鉸鏈區(qū)域下方的特定位點(diǎn)消化IgG,產(chǎn)生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內(nèi)消化,如果孵育時(shí)間延長(zhǎng),則不存在過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。由于FabRICATOR在生理反應(yīng)條件下消化IgG,因此保留了免疫反應(yīng)性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對(duì)小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來(lái)的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發(fā),用于需要高標(biāo)準(zhǔn)和一致性的生物技術(shù)應(yīng)用。有一種檢測(cè)FabRICATOR酶的方法。了解有關(guān)山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。上海FabRICATORIdeS蛋白酶抗體酶切

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