其可與dna鏈交叉連接,顯示出細(xì)胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無(wú)需載體轉(zhuǎn)運(yùn),即可通過(guò)帶電的細(xì)胞膜。由于細(xì)胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽(yáng)性,具有類(lèi)似烷化劑雙功能基團(tuán)的作用,可與細(xì)胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,破壞dna復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,高濃度時(shí)也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細(xì)胞有效、作用性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會(huì)引起副作用,與卵巢的損害有直接關(guān)系,有研究表明順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡。廣泛應(yīng)用于藥效評(píng)價(jià)、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)前沿領(lǐng)域。嘉定區(qū)疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開(kāi)始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開(kāi)始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無(wú)差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過(guò)順鉑注射后卵巢重量相比對(duì)照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無(wú)明顯差異。表5④動(dòng)情周期觀察(陰道涂片):3mg組動(dòng)物死亡時(shí)間早,無(wú)完整的動(dòng)情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動(dòng)情周期4-5天。分為四個(gè)階段,動(dòng)情前期:撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù),白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動(dòng)情期:角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù),由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動(dòng)情后期:片狀角化上皮細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有,無(wú)太大差異(圖c)。動(dòng)情間期:白細(xì)胞占絕大多數(shù),有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。靜安區(qū)疾病動(dòng)物模型建模公司上海東寰為您提供完善的小鼠動(dòng)物疾病模型。
呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型(animalmodelofrespiratorydiseases)1、肺炎動(dòng)物模型:通過(guò)在主支氣管注入活菌液。2、肺氣腫模型:給動(dòng)物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致熱溶解酶、敗血酶以及由膿性痰和白細(xì)胞分離出來(lái)的蛋白酶等,可復(fù)制成實(shí)驗(yàn)性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實(shí)驗(yàn)性肺氣腫病變明顯而且典型。3、肺水腫模型:用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫,或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液引起滲透性肺水腫。4、肺纖維化模型:氣管內(nèi)注入博來(lái)霉素是目前常用復(fù)制肺纖維化動(dòng)物模型方法。
pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號(hào)為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒(méi)有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒(méi)有。pcr體系:反應(yīng)條件:(2)f1代小鼠測(cè)序:通過(guò)pcr擴(kuò)增后測(cè)序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號(hào)pirb基因敲入小鼠測(cè)序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測(cè)f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測(cè)過(guò)程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過(guò)pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。疾病動(dòng)物模型建模實(shí)驗(yàn)室。
實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測(cè)動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地,檢測(cè)***水平是指:檢測(cè)雌***(e2)、促卵泡生長(zhǎng)素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測(cè)對(duì)比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說(shuō)明圖1:e2水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計(jì)示意圖。圖6:動(dòng)情周期檢測(cè)(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動(dòng)情前期,動(dòng)情期,動(dòng)情后期,動(dòng)情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對(duì)卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。大鼠疾病建模請(qǐng)找上海東寰。呼吸疾病動(dòng)物模型建模公司
小鼠是人類(lèi)疾病理想的動(dòng)物模型不僅因?yàn)樾∈笤谏砩吓c人類(lèi)極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。嘉定區(qū)疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)
動(dòng)物模型名稱:酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:150g-160g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法:用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油=1:3,連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):肝組織可見(jiàn)肝硬化病理改變(S1級(jí)~S4級(jí))。嘉定區(qū)疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)