牛凝血酶（Bovine Thrombin），作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶，具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。引言凝血酶是血液凝固過(guò)程中的關(guān)鍵酶，負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，從而促進(jìn)血栓形成。牛凝血酶因其高比活度（>2000 IU/mg）和高純度，在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來(lái)源與純化：牛凝血酶從牛血漿中提取，并通過(guò)一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化。活性測(cè)定：利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）底物測(cè)定凝血酶活性。應(yīng)用研究：通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)模型，研究牛凝血酶在血液學(xué)、分子生物學(xué)和藥物開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用。結(jié)果分子特性：牛凝血酶由兩條肽鏈組成，分子量約為37 KD，具有高度的專(zhuān)一性和高效的催化能力。生物學(xué)作用：牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽，形成纖維蛋白單體，參與血液凝固和傷口愈合?？蒲袘?yīng)用：牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗(yàn)工具等方面展現(xiàn)出重要價(jià)值。在某些疾病中，特定蛋白質(zhì)的泛素化水平可能發(fā)生變化，因此，泛素化蛋白質(zhì)可以作為疾病的生物標(biāo)志物。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

基因工程與抗體技術(shù)通過(guò)基因工程方法，可以構(gòu)建重組3C蛋白酶，并利用其切割特異性進(jìn)行活性驗(yàn)證。此外，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得3C蛋白酶抗體，可以探索利用抗體技術(shù)抑制3C蛋白酶活性，進(jìn)而達(dá)到抑制病毒復(fù)制的目的4。研究進(jìn)展與挑戰(zhàn)3C蛋白酶及其抑制劑的研究進(jìn)展迅速，但仍面臨挑戰(zhàn)。例如，需要深入了解不同耐藥突變對(duì)3CLpro自身活性的影響，以及不同抑制劑之間的交叉耐藥風(fēng)險(xiǎn)。這些研究對(duì)于開(kāi)發(fā)新的廣譜抗病毒藥物具有重要意義38。結(jié)論3C蛋白酶是一類(lèi)在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶，是抗病毒藥物開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)。深入研究3C蛋白酶的結(jié)構(gòu)、功能以及耐藥機(jī)制，對(duì)于開(kāi)發(fā)有效的抗病毒藥物和方法具有重要意義。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，3C蛋白酶的研究將為人類(lèi)戰(zhàn)勝病毒性疾病提供更多的科學(xué)依據(jù)策略。Recombinant Human MSPR/RonProtein,His Tag全長(zhǎng)跨膜蛋白是一類(lèi)特殊的蛋白質(zhì)，它們嵌入在細(xì)胞膜的磷脂雙分子層中，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)外的跨越。

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶，在病毒復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。鼻病毒屬于小RNA病毒科，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長(zhǎng)552bp，編碼的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量約為22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性，能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵，識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因，在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá)，純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶，該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點(diǎn)的融合蛋白，具有良好的生物學(xué)活性。同時(shí)，本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標(biāo)簽蛋白，有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名（Chinesesynonym）:3C蛋白酶英文別名（Englishsynonym）:3CProtease來(lái)源（Source）:大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽（label）:GST-3CProtease-MAT純度（Purity）:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度>95%分子量（Molecularweight）:47.38kDa比活性（Specificactivity）:500U/ml緩沖液組分（Buffer）:50mMTris-HCl，150mMNaCl，1mMEDTA，1mMDTT，pH7.0酶活定義（UnitDefinition）:在緩沖液中切割100μg被檢測(cè)的融合蛋白，反應(yīng)條件為4℃16小時(shí),切割率≥90%運(yùn)輸和保存方法:干冰運(yùn)輸；保存于-20℃。

α-凝血酶（α-Thrombin）是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶，由凝血酶原（Prothrombin，II因子）經(jīng)蛋白水解活化而來(lái)。它在凝血過(guò)程中起著非常重要的作用，不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生，還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來(lái)尋找前輔因子：V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi)，活化的X因子（FactorXa）切割凝血酶原，釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈（Achain）（Mw~6,000）和一條重鏈（Bchain）（Mw~31,000）通過(guò)二硫鍵連接而成。某些情況下，α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對(duì)α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段（B1，B2）組合而成。除了用于凝血研究之外，α-凝血酶還常用來(lái)位點(diǎn)特異性切割融合蛋白。基因重組時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間，通過(guò)凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過(guò)親和層析技術(shù)快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子，Va因子和磷脂活化而得，經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)確保凝血酶原的完全活化，并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考，提供的酶活力不少于3091NIHU/mg?？缒さ鞍自谒拗骷?xì)胞中的表達(dá)水平通常有點(diǎn)低，研發(fā)困難，對(duì)蛋白表達(dá)生產(chǎn)平臺(tái)技術(shù)要求極高。

Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達(dá)重組腸激酶(不帶標(biāo)簽)注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切，可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。3.在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切會(huì)受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，為獲得理想的酶切結(jié)果，請(qǐng)先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中，然后再進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn)；若不方便透析，可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白比例不變；若干擾因素很多，且不便去除，需要適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間，有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對(duì)Enterokinase有很強(qiáng)的抑制作用，痕量的磷酸鹽都會(huì)嚴(yán)重影響Enterokinase的活性，因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶，切割蛋白使用量少，可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶，可用陰離子交換樹(shù)脂（如DEAE-FF）對(duì)其進(jìn)行洗脫。推薦洗脫條件如下：平衡緩沖液：25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液：25mMTris-HClpH8.0，含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好，可適當(dāng)增加酶量，或適當(dāng)延長(zhǎng)酶切時(shí)間。泛素蛋白（Ubiquitin，簡(jiǎn)稱(chēng)Ub）是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白，具有高度保守性。Recombinant Mouse CDH17/Cadherin 17 Protein,His Tag

重組人泛素是一種蛋白質(zhì)，它是一種含有76個(gè)氨基酸的高度保守的蛋白質(zhì)，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中。Recombinant Human CD72 Protein,His Tag

重組腸激酶（rEK）是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段，氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致，有著和天然提取的腸激酶同樣特異的酶切位點(diǎn)，切割位點(diǎn)Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽，同時(shí)重組腸激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性。重組腸激酶為采用重組大腸桿菌分泌表達(dá)的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶，不含其他蛋白酶，可以在較寬pH范圍（4.5-9.5）和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白，并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標(biāo)簽，由于具有極高酶切活性，酶切反應(yīng)使用量少，不影響下游蛋白應(yīng)用，可不考慮除去。產(chǎn)品信息規(guī)格100U/200U/500U/1000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)來(lái)源（Source）大腸桿菌表達(dá)分子量（MolecularWeight）理論值25.85kDa外觀（Appearance）澄清、無(wú)色至淡黃色液體酶濃度（EnzymeConcentration）≥5U/uL活性定義（ActivityDefinition）一個(gè)活性單位定義為25°C，12-16h，Recombinant Human CD72 Protein,His Tag