但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng)，此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)、安全量，是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得。但是由于不同的細(xì)胞系（株）不同，同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同（細(xì)胞耐受性不同等），且存在的地域性水質(zhì)差異等，在實(shí)際生產(chǎn)過程中也可稍作改動(dòng)，但使用者需做相應(yīng)的檢測(cè)（理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗(yàn)等）。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH～，在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能**。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10～25mmol/L。**酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是在沒有葡萄糖的條件下，細(xì)胞也可以代謝**酸鈉。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，4℃下放置1周可分解50%，使用中**好單獨(dú)配制，置-20℃冰箱中保存，使用前加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。減血清培養(yǎng)基減少了血清成分的變異性。湖北無血清培養(yǎng)基價(jià)格信息

    二氧化碳不斷被釋放，培養(yǎng)液變酸，pH值發(fā)生變化。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中**常用的pH指示劑，但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷，需要實(shí)驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)積累，存在較大的主觀性。實(shí)際上，個(gè)性化細(xì)胞培養(yǎng)基或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅含量較少或是不含酚紅，只能通過pH計(jì)或者pH電極進(jìn)行pH值的檢測(cè)，結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。緩沖能力細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過程中造成細(xì)胞培養(yǎng)液pH波動(dòng)的主要物質(zhì)是細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2。在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸，細(xì)胞培養(yǎng)液pH很快下降；打開培養(yǎng)器具時(shí)CO2逸出則會(huì)引起pH升高。細(xì)胞培養(yǎng)基通常采用NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)，按下列化學(xué)反應(yīng)方程式調(diào)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值：H2O+CO2→H2CO3?H++HCO3－NaHCO3?Na++HCO3－此外，還有緩沖能力較高的磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。但碳酸鹽緩沖系統(tǒng)的細(xì)胞毒性小、成本低，在細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用得更為***。另一種較為常用的緩沖液是HEPES（羥乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一種非離子兩性緩沖液，在pH~。高濃度的HEPES可能對(duì)細(xì)胞**性作用，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)HEPES的添加濃度一般為10～25mmol/L。滲透壓細(xì)胞必須生活在等滲的環(huán)境中，大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定耐受性。研究顯示。陜西MEM a培養(yǎng)基哪家好減血清培養(yǎng)基減少了血清中的未知因素對(duì)細(xì)胞的影響。

    微量元素在細(xì)胞內(nèi)通常以與有機(jī)物結(jié)合的形式存在。其中鐵在細(xì)胞中參與氧的轉(zhuǎn)運(yùn)；鈷是維生素B12的組成部分，參與葉酸的合成和脂肪酸的合成；鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細(xì)胞內(nèi)具有重要功能的酶，還具有穩(wěn)定核酸結(jié)構(gòu)的功能；亞硒酸鈉中的硒，作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔基，具有抗過氧化物能力，參與消除細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸過氧化物，提高細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和活性。在低血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中，為滿足細(xì)胞生長(zhǎng)增殖需要，常常添加一些成份：蛋白質(zhì)、多肽、核苷、嘌呤、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、脂類、及一些血清替代因子等。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用，動(dòng)物細(xì)胞對(duì)許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用，如白蛋白、傳遞蛋白、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸、***、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白，能夠結(jié)合鐵，促進(jìn)細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收，并具有***作用，其促生長(zhǎng)作用可能與其具有生長(zhǎng)因子的功能有關(guān)。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對(duì)葡萄糖和氨基酸的利用，商業(yè)化中一些生長(zhǎng)因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中，主要用來刺激細(xì)胞增殖，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一種重要的刺激細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物，是腦磷酸的合成前提。

    此法由巴斯德創(chuàng)立，用于酒類消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有兩種：一種為℃加熱15秒，另一種為63-66℃加熱30分鐘。大多采用第一種方法。(2)煮沸法。在1個(gè)大氣壓下，水煮沸后溫度達(dá)100℃，煮沸5分鐘后可殺死一般**繁殖體。如于水中加入2%碳酸鈉，可將其沸點(diǎn)提高至105℃，既可促進(jìn)芽胞的殺滅，又可防止金屬器皿生銹。(3)流通蒸氣消毒法。又稱常壓蒸氣消毒法，常用附諾(Amold)流通蒸氣**器，利用1個(gè)大氣壓下100℃水蒸氣進(jìn)行消毒，10-30分鐘后**繁殖體被殺死，但對(duì)芽孢作用不大。(4)間歇**法（fractionalsterilization）。采用間歇方式達(dá)到**目的。將**物品置于阿諾流通蒸氣**器內(nèi)，100℃加熱15-30分鐘，每日1次，連續(xù)3次。每次**后取出物品置37℃孵育箱過夜，致殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過流通蒸氣**器加熱而被殺滅。如此反復(fù)，既可殺滅芽胞，又可使不耐高溫的物質(zhì)免受影響。若某些物質(zhì)不耐100攝氏度，則可將溫度下降至75-80℃，每次加熱時(shí)間延長(zhǎng)到30-60分鐘，常用血清凝固器對(duì)呂氏血清培養(yǎng)基和L-J培養(yǎng)基的**屬此方法。(5)高壓蒸氣火菌法。利用密閉的耐高壓蒸氣**器(autoclave)，在蒸氣不外溢的條件下，使鍋內(nèi)壓力增高，隨之蒸氣溫度也增高。通常在℃。無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞提供了無血清的純凈環(huán)境。

    維持15-20分鐘，可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。（二）下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗(yàn)證方法高壓蒸氣**器使物品**后達(dá)到無菌要求，這是**實(shí)驗(yàn)中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實(shí)驗(yàn)成敗的**基礎(chǔ)**關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓**外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對(duì)無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基**不徹底，直接關(guān)系到對(duì)**的無菌試驗(yàn)結(jié)果。因此必須認(rèn)真對(duì)高壓**器進(jìn)行**效果的驗(yàn)證。為此我們提供了進(jìn)行**效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易可行的方法。1．試驗(yàn)材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學(xué)指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)。2．方法與結(jié)果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡(jiǎn)稱菌片）用無菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中。以上兩種試管各準(zhǔn)備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層，則需放10處。F12培養(yǎng)基適用于基因編輯和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。湖北無血清培養(yǎng)基價(jià)格信息

減血清培養(yǎng)基減少了血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的干擾。湖北無血清培養(yǎng)基價(jià)格信息

    才能滿足新細(xì)胞合成、細(xì)胞代謝等生化反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。此外，還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。水是細(xì)胞的主要成份，也是細(xì)胞賴以生存的主要環(huán)境。細(xì)胞培養(yǎng)液中90%以上的成份是水。細(xì)胞對(duì)水的品質(zhì)非常敏感，水的品質(zhì)將直接影響細(xì)胞培養(yǎng)的效果。而水中通常含有重金屬、氯、磷、有機(jī)物、熱原等污染物，細(xì)胞培養(yǎng)用水須經(jīng)過純化，品質(zhì)應(yīng)符合***典注射用水標(biāo)準(zhǔn)或者超純水的標(biāo)準(zhǔn)。能源和碳源是用于維持細(xì)胞生命和支持細(xì)胞生長(zhǎng)，主要包括糖、糖酵解的產(chǎn)物和谷氨酰胺，其他氨基酸是次要的能源和碳源物質(zhì)。細(xì)胞能夠利用的糖類主要是六碳糖，目前大多體外培養(yǎng)時(shí)選取葡萄糖作為細(xì)胞的主要碳源和能量來源，因此細(xì)胞培養(yǎng)基中基本都含有葡萄糖，含量一般為5～25mmol/L。在葡萄糖濃度較高時(shí)，細(xì)胞主要通過擴(kuò)散作用吸收葡萄糖，細(xì)胞膜內(nèi)外的葡萄糖濃度梯度是細(xì)胞吸收葡萄糖的動(dòng)力；在葡萄糖濃度較低時(shí)，主要由鈉離子推動(dòng)的高親和性轉(zhuǎn)運(yùn)過程使細(xì)胞攝取葡萄糖。葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞后參與糖酵解、核酸代謝、糖原合成、能量代謝以及一些氨基酸的合成。與體內(nèi)的能量供應(yīng)途徑不同。湖北無血清培養(yǎng)基價(jià)格信息