將蒸過的原料置于室溫下過夜，未被殺死的孢子便發(fā)芽生長，芽孢發(fā)育成營養(yǎng)細胞，再30min便可殺死。如此連續(xù)反復進行2-3次，亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發(fā)酵罐或其他培養(yǎng)裝置中進行的，它是在配制罐中配好培養(yǎng)基后，通過**管道輸入發(fā)酵罐等培養(yǎng)設備中，然后開始**。在進行培養(yǎng)基的間歇**之前，通常先將發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置的分空氣過濾器進行**，并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時，應先放去夾套或蛇管中的冷水，開啟排氣管閥，通過空氣管向發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基通入蒸汽進行加熱，同時，也可在夾套內(nèi)通蒸汽進行間接加熱。當培養(yǎng)基溫度升到70℃左右時，從取樣管和放料管向罐內(nèi)通入蒸汽進一步加熱，當溫度升至120℃，罐壓為1*105Pa（表壓）時，打開接種、補料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進行排汽，當然在保溫過程中，應注意凡在培養(yǎng)基液面下的各種進口管道都應通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道則應排放蒸汽，這樣才能不留死角，從而保證**徹底。保溫結(jié)束后，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后，向罐內(nèi)通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷水降溫，使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度，進行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。無酚紅培養(yǎng)基在敏感細胞系的培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)越。湖南基礎培養(yǎng)基哪家好

    由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設備，投資少，對設備要求簡單，對蒸汽的要求也比較低，且**效果可靠，因此，間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。（三）、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義：連續(xù)**也叫連消，將配制好的并經(jīng)預熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內(nèi)達到**溫度（126～132℃）。然后進入維持罐（或維持管），使在**溫度下維持3～7分鐘后再進入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**（空罐**）過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達到～MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時，需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前，直接用蒸汽進行空罐**（空消），用無菌空氣保壓，待培養(yǎng)基流入罐后，開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式，其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程：（1）由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高，經(jīng)維持段保溫一定時間后，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。青海Ham's F12培養(yǎng)基進口使用減血清培養(yǎng)基能減少實驗中的血清干擾。

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實驗研究結(jié)果表明，培養(yǎng)基在高溫**的過程中，其營養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級反應來描述其反應速度：式中—表示營養(yǎng)成分破環(huán)的速率，C：表示營養(yǎng)成分的濃度K'：為反應速度常數(shù)，1/s，應速度常數(shù)K'與溫度的關系，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應速度常數(shù)，1/S：反應的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應的***溫度，k同樣，**過程中的反應速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應的溫度從T1升高到T2，其反應的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過程實際上是營養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個平行性反應，對于平行性反應，反應溫度的提高，其兩個平行性反應的速度常數(shù)都增加，但增加的幅度（大?。﹨s不同，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實驗證明：營養(yǎng)成分為破壞的反應的活化能E的值為E,=—*103J/mol；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。

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    3)擬南芥葉片愈傷**的誘導方法：用手術剪刀剪開長勢良好的無菌葉片，用鑷子將其取出擺放在步驟(1)的誘導培養(yǎng)基中，使傷口接觸培養(yǎng)基；于溫度23-25℃、濕度50-70％、光照強度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)擬南芥根愈傷**的誘導方法：用鑷子取出無菌苗的根，用手術剪刀剪開后平鋪于步驟(2)的誘導培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件同步驟(3)。(5)cs誘導培養(yǎng)基的誘導結(jié)果為：擬南芥葉片愈傷**誘導時，培養(yǎng)6-8d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％；擬南芥根愈傷**誘導時，培養(yǎng)5-7d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)20-22d獲得較大體積的淡黃色松脆型愈傷**，且在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％。如圖5所示。對比培養(yǎng)例5：將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實例5，ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養(yǎng)基的誘導結(jié)果為：擬南芥葉片愈傷**誘導時，培養(yǎng)7-10d在切口處出現(xiàn)顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細胞的體外培養(yǎng)。北京基礎培養(yǎng)基供應商家

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