鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA，APTRA，BAPTA的衍生物，它們可以結(jié)合鈣離子從而顯示一個光譜響應(yīng)，使研究者可以用熒光顯微鏡來觀察細(xì)胞內(nèi)的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來進(jìn)行鈣信號的測定和成像。并可結(jié)合電生理設(shè)備、活細(xì)胞培養(yǎng)裝置等，適用于大強度、廣范圍的鈣信號測定。共聚焦顯微系統(tǒng)，共聚焦以激光為光源，且可配備氬離子光源，可以選擇可見光激發(fā)的鈣指示劑，進(jìn)行層掃，相比普通熒光顯微鏡有更好的空間分辨率。并且共聚焦除了配備大視野掃描鏡更可配置共振掃描振鏡，以滿足更高速成像應(yīng)用的需求。雙光子顯微系統(tǒng)使用長波長來激發(fā)熒光指示劑，具有較低的細(xì)胞毒性，也可適用于紫外激發(fā)的鈣指示劑，且可獲得和單光子共聚焦系統(tǒng)類似的空間分辨率。小結(jié)綜上可見，在研究鈣信號時，可結(jié)合樣品自身特點來選擇相應(yīng)的鈣指示劑，并考慮既有的實驗設(shè)備，來確定具體的實驗方案。同時還需進(jìn)一步摸索實驗數(shù)據(jù)的校正、控制等多種影響因素，可獲得可靠的圖像及熒光定量數(shù)據(jù)。細(xì)胞對鈣離子有一套完備的監(jiān)控系統(tǒng)以維持鈣的內(nèi)穩(wěn)態(tài)平衡。深圳在體鈣成像nVista

鈣成像技術(shù)通常使用熒光染料或報告基因來標(biāo)記細(xì)胞中的鈣離子。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時，鈣離子會進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致熒光染料或報告基因發(fā)出光信號。通過觀察光信號的強度和分布，可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術(shù)具有以下優(yōu)點：高靈敏度：可以檢測到細(xì)胞內(nèi)微小的鈣離子濃度變化。實時性：可以實時記錄鈣離子濃度的變化過程?？臻g分辨率高：可以清晰地觀察到鈣離子在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。無創(chuàng)性：可以通過huo體成像技術(shù)觀察動物體內(nèi)的鈣離子變化情況。可重復(fù)性：可以對同一群體細(xì)胞進(jìn)行多次成像，以評估不同處理或刺激的影響?？傊}成像技術(shù)是一種強大的生物醫(yī)學(xué)研究工具，可以幫助科學(xué)家們更好地了解細(xì)胞生理和病理狀態(tài)，為疾病診斷和zhi療提供有力支持。深圳在體鈣成像nVista鈣離子是哺乳動物神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的重要信使。

想要對鈣離子的動態(tài)變化進(jìn)行有效的檢測，鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結(jié)合鈣離子前幾乎無熒光，與鈣離子結(jié)合后，熒光強度xianzhu增強。利用這一原理，可以通過指示劑的信號強弱來觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化。根據(jù)激發(fā)光波長范圍，鈣離子指示劑可以分為可見光激發(fā)和紫外光激發(fā)，而根據(jù)其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有以下幾種：紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針、可見光激發(fā)Ca2+熒光探針、轉(zhuǎn)基因Ca2+指示劑。

nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進(jìn)行大范圍的動態(tài)熒光成像的設(shè)備。通過nVist，您可以視覺化細(xì)胞活動，同步行為學(xué)，以及長期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動。nVista被應(yīng)用于全球的研究機(jī)構(gòu)中，產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫。主要特征：利用GCamp鈣離子探針進(jìn)行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件，實現(xiàn)對焦，調(diào)焦，行為同步化單細(xì)胞分辨率下，可同時捕獲成百上千神經(jīng)元活動長時間追蹤細(xì)胞，追蹤時間可長達(dá)數(shù)月電子對焦，保證視野范圍的恒定自由動物行為學(xué)：可運用標(biāo)準(zhǔn)行為學(xué)測量方法，行為操作箱，迷宮，曠場等可進(jìn)行皮層，深部核團(tuán)，以及腦干，中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練鈣離子成像+自由活動行為學(xué)1.錨定特殊細(xì)胞類型，例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細(xì)胞的空間分辨率，可以分析細(xì)胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內(nèi)自由活動4.長時程追蹤同一細(xì)胞的放電規(guī)律變化：用于學(xué)習(xí)，記憶，藥物成癮等研究。5.可對腦內(nèi)的深部核團(tuán)進(jìn)行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個神經(jīng)元細(xì)胞。電子調(diào)焦功能，可通過軟件實現(xiàn)物理調(diào)焦。細(xì)胞內(nèi)鈣成像技術(shù)是通過向細(xì)胞內(nèi)載入鈣指示劑。

傳統(tǒng)的寬場熒光顯微鏡由于光散射的影響，只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像，共聚焦顯微鏡由于光損傷較大，一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展，在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行在體成像的時候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比。例如，用雙光子顯微鏡對海馬樹突棘的鈣離子信號進(jìn)行成像，研究神經(jīng)元突觸后長時程降低(Wangetal.,2000)；觀察在體小鼠運動皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務(wù)中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等。不過，這些實驗還是需要對動物進(jìn)行麻醉和固定，而神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒拥膭游镞M(jìn)行研究。近年來出現(xiàn)了通過植入性的microscope或microlens進(jìn)行在體freelymoving動物鈣成像的技術(shù)。使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動物大腦，從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號被光纖收集，然后通過Inscopix顯微鏡成像。動物頭部只需植入GRINlens，方便活動。鈣成像技術(shù)（calcium imaging）是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法。浙江在體鈣成像供應(yīng)商

清醒動物腦功能鈣成像的微型顯微鏡的研究在不斷實踐中。深圳在體鈣成像nVista

在神經(jīng)系統(tǒng)研究中，我們常使用鈣指示劑表征鈣離子濃度變化，以反映神經(jīng)元的活動。常見的鈣成像方法有雙光子熒光成像和單光子熒光成像兩種，其中后者是研究腦神經(jīng)活動的常用方法。但與雙光子成像相比，單光子成像更易受到來自神經(jīng)元的高水平串?dāng)_，導(dǎo)致信噪比降低。不僅如此，采集活動信號時還易被來自近距離通過的軸突和樹突的信號所污染，造成的非特異性信號，這些均嚴(yán)重影響對神經(jīng)元活動反應(yīng)的精細(xì)成像。因而，在單光子熒光成像的基礎(chǔ)上，研究團(tuán)隊在細(xì)胞核中表達(dá)遺傳編碼的鈣指示劑，從而消除神經(jīng)纖維信號。但與經(jīng)典的胞質(zhì)鈣成像相比，鈣進(jìn)入細(xì)胞核的要求降低了這種成像的時間精度。深圳在體鈣成像nVista