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德國(guó)單通道膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-01-28

1976年德國(guó)馬普生物物理化學(xué)研究所Neher和Sakmann在青蛙肌細(xì)胞上記錄記錄到AChjihuo的單通道離子電流1980年Sigworth等用負(fù)壓吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-sea1),降低了記錄時(shí)的噪聲1981年Hamill和Neher等引進(jìn)了膜片游離技術(shù)和全細(xì)胞記錄技術(shù)1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書(shū)問(wèn)世,奠定了膜片鉗技術(shù)的里程碑。膜片鉗技術(shù)原理膜片鉗技術(shù)是用玻璃微電極接觸細(xì)胞,形成吉?dú)W姆(GΩ)阻抗,使得與電極前列開(kāi)口處相接的細(xì)胞膜的膜片與周?chē)陔妼W(xué)上絕緣,在此基礎(chǔ)上固定電位,對(duì)此膜片上的離子通道的離子電流(pA級(jí))進(jìn)行監(jiān)測(cè)記錄的方法。脂質(zhì)層電導(dǎo)很低,由于雙分子層的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),形成了細(xì)胞的膜電容,通道蛋白開(kāi)閉狀況主要決定了膜電導(dǎo)的數(shù)值。德國(guó)單通道膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平

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20世紀(jì)初由Cole發(fā)明,Hodgkin和Huxleyw完善,目的是為了證明動(dòng)作電位的峰電位是由于膜對(duì)鈉的通透性發(fā)生了一過(guò)性的增大過(guò)程。但當(dāng)時(shí)沒(méi)有直接測(cè)定膜通透性的辦法,于是就用膜對(duì)某種離子的電導(dǎo)來(lái)**該種離子的通透性。

為了弄清膜電導(dǎo)變化的機(jī)制和離子通道的存在,也為了克服電壓鉗的缺點(diǎn)Erwin和Bert在電壓鉗的基礎(chǔ)上發(fā)明了膜片鉗,并利用該技術(shù)***在蛙肌膜上記錄到PA級(jí)的乙酰膽堿激動(dòng)的單通道電流,***證明了離子通道的存在。并證明在完整細(xì)胞膜上記錄到膜電流是許多單通道電流總和的結(jié)果。這一技術(shù)被譽(yù)為與分子克隆技術(shù)并駕齊驅(qū)的劃時(shí)代的偉大發(fā)明。二人因此獲得諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 日本雙電極膜片鉗參數(shù)離子和離子通道是細(xì)胞興奮的基礎(chǔ),亦即產(chǎn)生生物電信號(hào)的基礎(chǔ),生物電信號(hào)通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進(jìn)行測(cè)量。

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資料分析:一般電學(xué)性質(zhì)∶通過(guò)I/V關(guān)系計(jì)算得到單通道電導(dǎo),觀察通道有無(wú)整流。通過(guò)離子選擇性、翻轉(zhuǎn)電位或其它通道的條件初步確定通道類(lèi)型。通道動(dòng)力學(xué)分析∶開(kāi)放時(shí)間、開(kāi)放概率、關(guān)閉時(shí)間、通道的時(shí)間依賴(lài)性失活、開(kāi)放與關(guān)閉類(lèi)型(簇狀猝發(fā),Burst)樣開(kāi)放與閃動(dòng)樣短暫關(guān)閉(flickering),化學(xué)門(mén)控性通道的開(kāi)、關(guān)速率常數(shù)等數(shù)據(jù)。藥理學(xué)研究∶研究的藥物,阻斷劑、激動(dòng)劑或其它調(diào)制因素對(duì)通道活動(dòng)的影響情況。綜合分析得出結(jié)淪。

在大多數(shù)膜片鉗實(shí)驗(yàn),要求所有實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備均具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性,以使微電極與細(xì)胞膜之間的相對(duì)運(yùn)動(dòng)盡可能小。防震工作臺(tái)放置倒置顯微鏡和與之固定連接的微操縱器,其他設(shè)備置于臺(tái)外。屏蔽罩由銅絲網(wǎng)制成,接地以防止周?chē)h(huán)境的雜散電場(chǎng)對(duì)膜片鉗放大器的探頭電路的干擾。儀器設(shè)備架要靠近工作臺(tái),便于測(cè)量?jī)x器與光學(xué)儀器配接。倒置顯微鏡是膜片鉗實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的主要光學(xué)部件,它不僅具有較好的視覺(jué)效果,便于將玻璃電極與細(xì)胞的頂部接觸,而且是借助移動(dòng)物鏡來(lái)實(shí)現(xiàn)聚焦,具有較好的機(jī)械穩(wěn)定性。視頻監(jiān)視器主要是用來(lái)監(jiān)視實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的操作,特別是能將封接參數(shù)(如封接阻抗)與細(xì)胞的形態(tài)對(duì)應(yīng),以實(shí)現(xiàn)良好的封接。了解離子通道的功能以及結(jié)構(gòu)的關(guān)系對(duì)于從分子水平深入探討某些疾病措施等均具有十分重要的理論和實(shí)際意義。

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與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道,心肌細(xì)胞通過(guò)各種離子通道對(duì)膜電位和動(dòng)作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能。近年來(lái),國(guó)外學(xué)者在人類(lèi)心肌細(xì)胞離子通道特性的研究中取得了許多進(jìn)展,使得心肌藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)由動(dòng)物細(xì)胞模型向人心肌細(xì)胞成為可能。對(duì)離子通道生理與病理情況下作用機(jī)制的研究,通過(guò)對(duì)各種生理或病理情況下細(xì)胞膜某種離子通道特性的研究,了解該離子的生理意義及其在疾病過(guò)程中的作用機(jī)制。如對(duì)鈣離子在腦缺血神經(jīng)細(xì)胞損害中作用機(jī)制的研究表明,缺血性腦損害過(guò)程中,Ca2+介導(dǎo)現(xiàn)象起非常重要的作用,缺血缺氧使Ca2+通道開(kāi)放,過(guò)多的Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)就出現(xiàn)Ca2+超載,導(dǎo)致神經(jīng)元及細(xì)胞膜損害,膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能障礙,嚴(yán)重的可使神經(jīng)元壞死。膜片鉗技術(shù)實(shí)現(xiàn)了小片膜的孤立和高阻封接的形成。進(jìn)口雙分子層膜片鉗系統(tǒng)

細(xì)胞是動(dòng)物和人體的基本組成單元,細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的通信,是依靠其膜上的離子通道進(jìn)行的。德國(guó)單通道膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平

公司專(zhuān)業(yè)從事nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo的研究與開(kāi)發(fā),設(shè)計(jì)制造及生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)為一體的實(shí)體企業(yè),嚴(yán)格執(zhí)行國(guó)家質(zhì)量體系認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)。 本公司具備可靠研發(fā)隊(duì)伍,生產(chǎn)nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo等系列產(chǎn)品。儀器儀表上游的行業(yè)主要包括五金件、電子元器件、傳感器等;儀器儀表按應(yīng)用類(lèi)型可分為通用型和專(zhuān)業(yè)型;下游應(yīng)用非常極廣,包括石油化工、鋼鐵冶煉、電力(電表)、建筑測(cè)繪(測(cè)量?jī)x表)、軌道交通(汽車(chē)儀表盤(pán)等)等各行業(yè)。近幾年,我國(guó)儀器儀表行業(yè)呈現(xiàn)出高速發(fā)展的態(tài)勢(shì)。據(jù)中國(guó)儀器儀表行業(yè)協(xié)會(huì)發(fā)布的數(shù)據(jù),過(guò)去的幾年期間,除受全球經(jīng)濟(jì)的影響而此期間,全球儀器儀表市場(chǎng)的增幅只有3%~4%,我國(guó)儀器儀表行業(yè)的發(fā)展速度之快可見(jiàn)一斑??偨Y(jié)其中原因,與我國(guó)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展環(huán)境是密不可分的。智能儀表帶有微型處理系統(tǒng),或可接入微型計(jì)算機(jī)智能化儀器。它通過(guò)電子電路來(lái)轉(zhuǎn)換測(cè)量數(shù)據(jù),并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行存儲(chǔ)運(yùn)算邏輯判斷,通過(guò)全自動(dòng)化的操作過(guò)程得到準(zhǔn)確無(wú)誤的測(cè)量,因其強(qiáng)大的功能被應(yīng)用于各個(gè)行業(yè)。目前,智能儀器儀表的更新需求、新增需求和智能化比率在不斷提升。德國(guó)單通道膜片鉗蛋白質(zhì)分子水平

因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司在nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo一直在同行業(yè)中處于較強(qiáng)地位,無(wú)論是產(chǎn)品還是服務(wù),其高水平的能力始終貫穿于其中。滔博生物是我國(guó)儀器儀表技術(shù)的研究和標(biāo)準(zhǔn)制定的重要參與者和貢獻(xiàn)者。公司承擔(dān)并建設(shè)完成儀器儀表多項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目,取得了明顯的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。將憑借高精尖的系列產(chǎn)品與解決方案,加速推進(jìn)全國(guó)儀器儀表產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)力的發(fā)展。

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