高效液相色譜梯度洗脫類(lèi)似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過(guò)程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,通過(guò)載液中極性的變化來(lái)改變被分離組分的分離因素,以提離效果。梯度洗提可以分為兩種:a.低壓梯度(也叫外梯度):在常壓下,預(yù)先按一定程序?qū)煞N或多種不同極性的溶劑混合后,再用一臺(tái)高壓泵輸入色譜柱。b.高壓梯度(或稱(chēng)內(nèi)梯度系統(tǒng)):利用兩臺(tái)高壓輸液泵,將兩種不同極性的溶劑按設(shè)定的比例送入梯度混合室,混合后,進(jìn)入色譜柱。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,讓您滿意,歡迎您的來(lái)電!無(wú)錫進(jìn)口液相色譜系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)...
高效液相色譜分離原理離子(IonChromatography)用離子交換樹(shù)脂為固定相,電解質(zhì)溶液為流動(dòng)相。以電導(dǎo)檢測(cè)器為通用檢測(cè)器,為消除流動(dòng)相中強(qiáng)電解質(zhì)背景離子對(duì)電導(dǎo)檢測(cè)器的干擾,設(shè)置了柱。試樣組分在分離柱和柱上的反應(yīng)原理與離子交換色譜法相同。以陰離子交換樹(shù)脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當(dāng)待測(cè)陰離子Br-隨流動(dòng)相(NaOH)進(jìn)入色譜柱時(shí),發(fā)生如下交換反應(yīng)(洗脫反應(yīng)為交換反應(yīng)的逆過(guò)程):柱上發(fā)生的反應(yīng):R-HNaOH-===R-NaH2OR-HNaBr-===R-NaHBr-可見(jiàn),通過(guò)柱將洗脫液轉(zhuǎn)變成了電導(dǎo)值很小的水,消除了本底電導(dǎo)的影響;試樣陰離子Br-則被轉(zhuǎn)化成了相應(yīng)...
高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類(lèi)似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來(lái)進(jìn)行分離,而是按分子大小進(jìn)行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動(dòng)力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進(jìn)入色譜柱后,隨流動(dòng)相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過(guò)。在試樣中一些太大的分子不能進(jìn)入膠孔而受到排阻,因此就直接通過(guò)柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),一些很小的分子可以進(jìn)入所有膠孔并滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn)。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為...
雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)的更多細(xì)節(jié)VanquishDuo系統(tǒng)可采用多種分析檢測(cè)器,包括質(zhì)譜(MS)、二極管陣列檢測(cè)(DAD)、電霧式檢(CAD)、可變波長(zhǎng)檢測(cè)(VWD)和熒光檢測(cè)(FLD)。更高的樣品容量,高樣品容量為標(biāo)準(zhǔn)配置(四個(gè)板,競(jìng)品均為兩個(gè)板)。通過(guò)可以選配的ThermoScientific?Vanquish?Charger模塊可以進(jìn)一步增加樣品的容量。準(zhǔn)確的流量控制有利于幫助提高數(shù)據(jù)置信度采用雙泵通過(guò)三元溶劑梯度配比輸送流量,可以使所有的設(shè)備安裝在同一室內(nèi)。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),歡迎新老客戶來(lái)電!南京賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)優(yōu)惠價(jià)格雙LC...
高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用...
高效液相色譜分離原理液—固流動(dòng)相為液體,固定相為吸附劑(如硅膠、氧化鋁等)。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來(lái)進(jìn)行分離的。其作用機(jī)制是:當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱時(shí),溶質(zhì)分子(X)和溶劑分子(S)對(duì)吸附劑表面活性中心發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)吸附(未進(jìn)樣時(shí),所有的吸附劑活性中心吸附的是S),可表示如下:XmnSa======XanSm式中:Xm--流動(dòng)相中的溶質(zhì)分子;Sa--固定相中的溶劑分子;Xa--固定相中的溶質(zhì)分子;Sm--流動(dòng)相中的溶劑分子。當(dāng)吸附競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)達(dá)平衡時(shí):K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]式中:K為吸附平衡常數(shù)。[討論:K越大,保留值越大。]上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,歡迎您的來(lái)...
高效液相色譜法之實(shí)例:高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要其氣化,因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子量在400以上)的有機(jī)物(這些物質(zhì)幾乎占有機(jī)物總數(shù)的75%~80%)原則上都可以應(yīng)用高效液相色譜法來(lái)進(jìn)行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計(jì),在目前已知的化合物中,能用氣相色譜分析的大約占20%,而能用液相色譜分析的大約占70~80%。液相色譜分析可以用于:1、環(huán)境中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量分析;2、稠環(huán)芳烴的分析;3.陰離子分析。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,有需求可以來(lái)電咨詢(xún)!鹽城化學(xué)液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商反梯度應(yīng)用VanquishDuo系統(tǒng)提高定量分析水平,獲取更多未知化合物...
高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過(guò)三十多年的時(shí)間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類(lèi)、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲(chóng)劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有想法的不要錯(cuò)過(guò)哦!泰州化學(xué)液相色譜...
高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過(guò)三十多年的時(shí)間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類(lèi)、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲(chóng)劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,用戶的信賴(lài)之選,有需求可以來(lái)電咨詢(xún)!衢州...
高效液相色譜的歷史1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來(lái)描述他的彩色試驗(yàn)。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相...
高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹(shù)脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過(guò)程可表示如下:X-(溶劑中)(樹(shù)脂-R4NCl-)===(樹(shù)脂-R4NX-)Cl-(溶劑中)當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí):KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為:DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論:DX與保留值的關(guān)系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換...
串聯(lián)LC或LC-MS應(yīng)用提析通量VanquishDuo系統(tǒng)只需簡(jiǎn)單升級(jí)您的方法:將串聯(lián)LC或LC-MS納入您的工作流程可輕松實(shí)現(xiàn),合規(guī)性ThermoScientific?Chromeleon?色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(CDS)軟件適用于LC或LC-MS用戶,ThermoScientific?Xcalibur?軟件的ThermoScientific?標(biāo)準(zhǔn)儀器集成插件(SII)適用于LC_x005fMS用戶。簡(jiǎn)便的儀器方法向?qū)鼓鸁o(wú)需接受額外培訓(xùn)即可輕松創(chuàng)建新方法。ChromeleonCDS和Xcalibur軟件的SII插件引導(dǎo)用戶通過(guò)自動(dòng)系統(tǒng)體積考查和再生平衡泵的梯度組成實(shí)施串聯(lián)LC或LC-MS方法。液相...
液相色譜類(lèi)型液相色譜按其分離機(jī)理,可分為四種類(lèi)型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法分配色譜法這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體,樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離,類(lèi)似于萃取過(guò)程。一般常用的固定液有β,β-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。例如,利用氯代十八烷基硅...
高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹(shù)脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過(guò)程可表示如下:X-(溶劑中)(樹(shù)脂-R4NCl-)===(樹(shù)脂-R4NX-)Cl-(溶劑中)當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí):KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為:DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論:DX與保留值的關(guān)系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換...
以新視角看待分析效率VanquishDuo系統(tǒng)概述無(wú)論哪個(gè)VanquishDuo系統(tǒng)適用于您所在的實(shí)驗(yàn)室,每個(gè)系統(tǒng)都會(huì)提高您的投資回報(bào),并幫助您成功實(shí)現(xiàn)分析目標(biāo)。我們憑借在分析應(yīng)用、技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室服務(wù)支持方面的專(zhuān)業(yè)知識(shí),幫助您加速獲取樣品信息。優(yōu)勢(shì):提高投資回報(bào)率節(jié)省工作臺(tái)空間(只占用一臺(tái)儀器的空間)易于使用(內(nèi)置ChromeleonCDS向?qū)В┨岣週C或LC-MS梯度方法的樣品通量使任意分析應(yīng)用的樣品通量倍增同時(shí)運(yùn)行補(bǔ)充分析可靠地定量未知化合物上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有想法的不要錯(cuò)過(guò)哦!衢州高效液相色譜系統(tǒng)高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的...
液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí))。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChrom...
高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用...
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)色譜峰(peak)——組分流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)的連續(xù)信號(hào)產(chǎn)生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對(duì)稱(chēng)形正態(tài)分布曲線(高斯Gauss曲線)。不對(duì)稱(chēng)色譜峰有兩種:前延峰(leadingpeak)和拖尾峰(tailingpeak)。前者少見(jiàn)。峰底—基線上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的距離。峰高(peakheight,h)—峰的比較高點(diǎn)至峰底的距離。峰寬(peakwidth,W)—峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作兩條切線與基線的兩個(gè)交點(diǎn)間的距離。W=4σ半峰寬(peakwidthathalf-height,Wh/2)—峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的...
高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用...
正反色譜正相色譜法采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動(dòng)相為相對(duì)非極性的疏水性溶劑(烷烴類(lèi)如正已烷、環(huán)已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間。常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物(如酚類(lèi)、胺類(lèi)、羰基類(lèi)及氨基酸類(lèi)等)。反相色譜法一般用非極性固定相(如C18、C8);流動(dòng)相為水或緩沖液,常加入甲醇、乙腈、異丙醇、四氫呋喃等與水互溶的有機(jī)溶劑以調(diào)節(jié)保留時(shí)間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用,據(jù)統(tǒng)計(jì),它占整個(gè)HPLC應(yīng)用的80%左右。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司。合肥原裝液相色譜系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)雙LC的Van...
賽默飛超高效液相色譜系統(tǒng)Vanquish系統(tǒng)的設(shè)計(jì)以色譜柱和用戶為中心,幫助用戶得到更好的結(jié)果、更多的結(jié)果、提供更好的交互體驗(yàn)。VanquishUHPLC系統(tǒng)是一套整合的、完全生物兼容的系統(tǒng),滿足色譜工作者對(duì)于UHPLC的苛刻要求。更好的分離:比以往任何時(shí)候都能分離更多的峰。Vanquish系統(tǒng)在任何方面都具有更好的性能。該系統(tǒng)支持更高的壓力,具有現(xiàn)代化的柱溫控制,更準(zhǔn)確的流路體積控制,更好的線性,更高的靈敏度。Vanquish系統(tǒng)采用色譜技術(shù),確保優(yōu)的性能,滿足您嚴(yán)苛的分離要求。更多的結(jié)果:為您的項(xiàng)目節(jié)省時(shí)間。該系統(tǒng)提**析速度。提高樣品容量,改良耐用性。再也不用擔(dān)心項(xiàng)目的截止日期了。上海禹...
正反色譜正相色譜法采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動(dòng)相為相對(duì)非極性的疏水性溶劑(烷烴類(lèi)如正已烷、環(huán)已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間。常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物(如酚類(lèi)、胺類(lèi)、羰基類(lèi)及氨基酸類(lèi)等)。反相色譜法一般用非極性固定相(如C18、C8);流動(dòng)相為水或緩沖液,常加入甲醇、乙腈、異丙醇、四氫呋喃等與水互溶的有機(jī)溶劑以調(diào)節(jié)保留時(shí)間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用,據(jù)統(tǒng)計(jì),它占整個(gè)HPLC應(yīng)用的80%左右。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,歡迎新老客戶來(lái)電!金華原裝液相色譜系統(tǒng)價(jià)格...
雙LC應(yīng)用VanquishDuo系統(tǒng)獲得雙倍的分析通量或更詳細(xì)的樣品信息雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)可在一臺(tái)儀器上同時(shí)運(yùn)行相同或不同的方法,從而提高了分析通量以及擴(kuò)展了樣品信息,同時(shí)比較大限度地提高了分析效率和性能。雙LC的獨(dú)特VanquishDuo系統(tǒng)將:?通過(guò)降低每個(gè)樣品的分析成本提高投資回報(bào)率?在不更改驗(yàn)證方法的情況下提高樣品通量?在不占用多余工作臺(tái)空間的情況下增加樣品容量?采用多種方法分析同一組樣品,縮短了樣品制備時(shí)間并盡可能獲取了更多的樣品信息液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來(lái)電!淮南賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)高效液相色譜進(jìn)樣裝置⑴注射...
液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí))。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChrom...
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn):①高壓:流動(dòng)相為液體,流經(jīng)色譜柱時(shí),受到的阻力較大,為了能迅速通過(guò)色譜柱,必須對(duì)載液加高壓。②高速:分析速度快、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個(gè)樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時(shí)。③高效:分離效能高??蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到比較好分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。④高靈敏度:紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢(shì)。⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分...
高效液相色譜的歷史1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來(lái)描述他的彩色試驗(yàn)。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相...
賽默飛高效液相色譜業(yè)務(wù)副總裁兼總經(jīng)理FraserMcLeod表示:“在整個(gè)生物制藥的流程中,從藥物研發(fā)到質(zhì)控的批次放行,數(shù)據(jù)完整性對(duì)于決策是必不可少的。為快速獲取可靠結(jié)果,靈敏度和通量非常關(guān)鍵。我們開(kāi)發(fā)出的這套系統(tǒng)展示出在復(fù)雜分析應(yīng)用時(shí)的辨分離和重復(fù)性。”?VanquishFlexUHPLC系統(tǒng)采用獨(dú)特設(shè)計(jì),即便在高通量的情況下,仍可以保證分析物色譜峰擁有尖銳峰形,實(shí)現(xiàn)在較短時(shí)間內(nèi)分析更多樣品。該系統(tǒng)良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性為數(shù)據(jù)質(zhì)量提供了可靠保障,確保能夠分析大量的樣品,以供質(zhì)控分析比較。其重要特點(diǎn)如下:?新型四元梯度泵模塊,設(shè)計(jì)穩(wěn)健,性能良好,保證高通量的前提下依然可提供方法開(kāi)發(fā)的靈活性。?泵...
高效液相色譜的應(yīng)用高效液相色譜應(yīng)用非常,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。(1)分離混合物高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類(lèi)繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過(guò)與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。(2)生化分析由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化...
液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí))。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChrom...
高效液相色譜分離原理離子對(duì)(IonPairChromatography)離子對(duì)色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱(chēng)為對(duì)離子或反離子)加到流動(dòng)相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對(duì)化合物,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機(jī)相式中:X水相--流動(dòng)相中待分離的有機(jī)離子(也可是陽(yáng)離子);Y-水相--流動(dòng)相中帶相反電荷的離子對(duì)(如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等);XY---形成的離子對(duì)化合物。當(dāng)達(dá)平衡時(shí):KXY=[XY-]有機(jī)相/[X]水相[Y-]水相根據(jù)定義,分配系數(shù)為:DX=[XY-]有機(jī)相/[X]水相=KXY[Y-]水相...