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Trizol是一種總RNA抽提試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速裂解細(xì)胞，壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離...

具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進(jìn)行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細(xì)胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細(xì)胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細(xì)胞碎片等亞細(xì)胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每...

提取RNA的詳細(xì)步驟：首先，將研缽晾干夠，倒入1/3體積的液氮，加入0.2g均質(zhì)的植物材料，充分研磨后轉(zhuǎn)入一個(gè)含有300微升GMT的1.5ml的離心管中，搖勻。然后，加入30微升2mol/lNaAc進(jìn)行搖勻，加入300微升酸酚搖勻，加入100微升的氯仿?lián)u勻。然...

原代細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用，市場(chǎng)前景廣闊。原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和部位后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把靠前代至第十代以...

原代細(xì)胞的幾大特點(diǎn)：1、干細(xì)胞功能表達(dá)體現(xiàn)出生命發(fā)育、成熟、衰老的不同階段由于早期的干細(xì)胞，增殖分化能力強(qiáng)，新生的細(xì)胞數(shù)量大于死亡的細(xì)胞數(shù)量，使生命處于生長(zhǎng)發(fā)育的佳狀態(tài)。隨著個(gè)體發(fā)育的成熟，干細(xì)胞增殖分化能力趨于穩(wěn)定，這時(shí)的干細(xì)胞能及時(shí)分化出新的細(xì)胞替代衰老的...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操...

原代細(xì)胞與細(xì)胞系：永生化細(xì)胞系通常具有更快的倍增時(shí)間并可持續(xù)地分裂，為實(shí)驗(yàn)提供一致的研究工具。然而，每次分裂都會(huì)引起遺傳漂移，降低了它們的生物學(xué)相關(guān)性。其優(yōu)點(diǎn)在于，當(dāng)需要相同的遺傳背景時(shí)，可以從一個(gè)細(xì)胞系產(chǎn)生整個(gè)克隆群體以具有相同的基因型。但是，哺乳動(dòng)物原代細(xì)...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒：1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù)，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，R...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA、DN段等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中...

在這項(xiàng)新的研究中，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子，從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解，增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾（RNAi）的靶向方法：利用這些天然的納米顆粒（即外泌...

PS不是你想有，想有就能有，迄今為止所發(fā)現(xiàn)的外泌體，并非所有的外膜表面都暴露PS。例如，細(xì)菌來源的外泌體膜表面沒有PS，因此，本款試劑不能提取這種外泌體?，F(xiàn)在的研究尚未得知是否所有的外泌體上都會(huì)露出PS，但是上述的外泌體標(biāo)記根據(jù)細(xì)胞種類不同表現(xiàn)出的信號(hào)強(qiáng)弱差大...

外泌體因諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)而被眾人知曉，也因其作為生命信息傳遞者，在體液中普遍存在及易獲得性等特點(diǎn)被譽(yù)為液體活檢"新貴"，成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點(diǎn)，尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[。外泌體作為細(xì)胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA...

可以。為了能夠高效提取細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體，磁珠可重復(fù)使用5次（同一樣品）。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細(xì)胞上清樣本建議進(jìn)行濃縮后再回收，提取時(shí)可進(jìn)行反復(fù)抽提，提高提取效率。用血液樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復(fù)利用；若...

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學(xué)破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構(gòu)成細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細(xì)胞壁，此法對(duì)堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格，堿的濃度不可過濃，應(yīng)控制在1％，并且對(duì)提取溫度也有一定的要求，提取時(shí)間短。因?yàn)樵谶^分劇烈的...

如果把一個(gè)細(xì)胞比作一個(gè)城市，那么DNA就像是一個(gè)管理人員，它坐在細(xì)胞核內(nèi)，監(jiān)視著“細(xì)胞城”的一舉一動(dòng)，像哪里細(xì)胞膜破了需要修補(bǔ)，什么時(shí)候需要合成蛋白質(zhì)，顯而易見，光靠我們DNA管理人員一個(gè)人自然忙不過來啦，于是我們的DNA管理人員決定給自己找一些“打工仔”，它...

細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)（cytoplasmicmatrix；cytoplasmicgroundsubstance；groundplasm）是除去能分辨的細(xì)胞器和顆粒以外的細(xì)胞質(zhì)中膠態(tài)的基底物質(zhì)，現(xiàn)又稱細(xì)胞溶膠。蛋白聚糖的主要成份是糖胺聚糖,是由重復(fù)二糖單位構(gòu)成的無(wú)分支長(zhǎng)鏈...

什么是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）：多細(xì)胞生物，不光由細(xì)胞組成，還包括分布于細(xì)胞外空間的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）由三維網(wǎng)構(gòu)成，除了蛋白聚糖和葡糖胺聚糖，膠原蛋白，彈力蛋白和基礎(chǔ)纖維之外，在這個(gè)空間里還有血管，淋巴管和神經(jīng)末梢，防御細(xì)胞和基底膜。ECM...

這種有限的分裂能力體內(nèi)的細(xì)胞相似，一旦細(xì)胞在體內(nèi)完全分化以發(fā)揮其特殊功能，細(xì)胞將停止增殖-這是固有的保護(hù)性衰老過程。此外，某些原代細(xì)胞有絲分裂后，無(wú)論是在體內(nèi)或體外培養(yǎng)中都不增殖（例如，神經(jīng)元，骨骼肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，周細(xì)胞，終末分化的肝細(xì)胞）。因此，每次進(jìn)行實(shí)...

這種有限的分裂能力體內(nèi)的細(xì)胞相似，一旦細(xì)胞在體內(nèi)完全分化以發(fā)揮其特殊功能，細(xì)胞將停止增殖-這是固有的保護(hù)性衰老過程。此外，某些原代細(xì)胞有絲分裂后，無(wú)論是在體內(nèi)或體外培養(yǎng)中都不增殖（例如，神經(jīng)元，骨骼肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，周細(xì)胞，終末分化的肝細(xì)胞）。因此，每次進(jìn)行實(shí)...

原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)步驟為：1）將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出并消毒除去存留在組織上的細(xì)菌、細(xì)菌、等污染源，這些污染源將會(huì)所需培養(yǎng)的原代細(xì)胞凋亡、停止生長(zhǎng)和繁殖直至死亡，因此整個(gè)原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中較全在無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行。2）將組織塊在選定的蛋白酶溶液中浸泡20-30分...

RNA提取試劑注意事項(xiàng)：1、必須戴一次性手套操作，且盡量不要對(duì)著RNA樣品說話，以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物質(zhì)苯酚，避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛，請(qǐng)戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。如皮膚接觸TRIReagent，請(qǐng)...

原代細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用，市場(chǎng)前景廣闊。原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和部位后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把靠前代至第十代以...

細(xì)胞外基質(zhì)的主要類型及功能：1、結(jié)構(gòu)蛋白，包括膠原和彈性蛋白，分別賦予胞外基質(zhì)強(qiáng)度和韌性；2、蛋白聚糖，由蛋白質(zhì)和多糖共價(jià)形成，具有高度親水性，從而賦予胞外基質(zhì)抗壓的能力；3、粘連糖蛋白，包括纖連蛋白和層粘連蛋白，有助于細(xì)胞粘連到胞外基質(zhì)上。植物細(xì)胞的細(xì)胞壁相...

膠原酶的配制：建議看相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行膠原酶的配制。小編常用的是DMEM進(jìn)行配制，配制好的膠原酶消化液放置在37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱（注意現(xiàn)用現(xiàn)配）。胰酶（酶聯(lián)合法獲取原代細(xì)胞中會(huì)加入胰酶，相關(guān)文章也蠻多的）膠原酶消化時(shí)間：根據(jù)組織特性，消化時(shí)間會(huì)有差異。以小鼠腎細(xì)胞為...

細(xì)胞外基質(zhì)深入研究該團(tuán)隊(duì)提出：細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)成分豐富,其提取方法多樣,具有指導(dǎo)細(xì)胞、傳遞信號(hào)、診治疾病及再生修復(fù)等眾多功能。細(xì)胞外基質(zhì)作為一種精密有序的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)在組織再生與修復(fù)中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),它能提供較接近于體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境,加之其富含的各種活性分子可為細(xì)...

RNA提取關(guān)鍵點(diǎn)病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性，在提取時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴口罩和手套等各種防護(hù)裝備，以防實(shí)驗(yàn)室污染。而有種「自動(dòng)滅活」的方法，在更加便利的同時(shí)，也能更好的保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase，這種酶也會(huì)加速RNA的降解。為了...

細(xì)胞傳代的方法都有哪些：根據(jù)不同的細(xì)胞采取不同的方法。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代；部分貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用直接吹打即可傳代；懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打。原代培養(yǎng)的開始傳代應(yīng)注意的問題？細(xì)胞沒有生長(zhǎng)到足以覆蓋瓶底...

基質(zhì)：曾稱為“一種分析物（analyte）的環(huán)境（milieu）”，即指標(biāo)本中除分析物以外的一切組成。以血清膽固醇（Chol）測(cè)定而言，就是指Chol以外血清中的一切成分及其物理、化學(xué)性質(zhì)?；|(zhì)是由生物大分子構(gòu)成的無(wú)定形膠狀物，無(wú)色透明，具有一定黏性，孔隙中有...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn)，博取眾家之長(zhǎng)，根據(jù)多年來市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來。具有操作步驟少，實(shí)驗(yàn)快捷，RNA產(chǎn)量純度高，充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要，適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量：每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不...