腫瘤細(xì)胞成像：近紅外熒光染料IR-780具備使多種腎透明細(xì)胞*細(xì)胞顯像的能力，對(duì)正常腎胚上皮細(xì)胞則無此能力，可用于血液中腎透明細(xì)胞*細(xì)胞的特異性診斷。這為腫瘤細(xì)胞的檢測和診斷提供了新的方法21。疾病標(biāo)志物檢測：設(shè)計(jì)合成的近紅外熒光探針RB-Phenylacrylate(NOF1)，用于高選擇性和高靈敏度檢測半胱氨酸(Cys)，并成功應(yīng)用于活細(xì)胞、斑馬魚和小鼠中半胱氨酸的近紅外熒光成像檢測。近紅外熒光探針RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于過氧亞硝酸根的熒光成像，實(shí)現(xiàn)了活細(xì)胞和小鼠炎癥模型中ONOO?的熒光成像檢測。這些探針為疾病標(biāo)志物的檢測和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近紅外氧雜蒽熒光染料如KRhs，可用于超分辨率成像。KRhs顯示出強(qiáng)烈的近紅外發(fā)射峰，在700nm處具有高熒光量子產(chǎn)率，且在沒有增強(qiáng)緩沖液的幫助下，表現(xiàn)出隨機(jī)熒光開關(guān)特性，支持單熒光團(tuán)的時(shí)間分辨定位。KRhs被功能化為KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo，分別具有線粒體、質(zhì)膜和融合蛋白靶向能力，可用于活細(xì)胞中這些目標(biāo)的超分辨率成像**-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。遼寧生物發(fā)光熒光染料

小動(dòng)物***成像技術(shù)（invivoimagingtechnology）是利用高靈敏度的光學(xué)檢測儀器直接檢測動(dòng)物***體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為研究的一類技術(shù)，是近年來發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法，是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域[1]。***動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在***內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標(biāo)記的小分子物質(zhì)如基因、細(xì)胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導(dǎo)入到***體內(nèi)，通過小動(dòng)物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)熒光集團(tuán)到達(dá)高能量狀態(tài)，而后產(chǎn)生波長較激發(fā)光長的發(fā)射光，然后通過高靈敏度制冷CCD鏡頭探測到***內(nèi)的發(fā)射光。通過***成像技術(shù)可以觀測***動(dòng)物體內(nèi)**的生長和轉(zhuǎn)移、炎癥的發(fā)生、特定基因的表達(dá)和藥物作用效果等生物學(xué)過程。云南小動(dòng)物熒光染料異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸酯反應(yīng)基團(tuán)這有助于其對(duì)通常存在于生物分子中的動(dòng)漫和巰基基團(tuán)具有反應(yīng)性。

熒光染料的穩(wěn)定性在動(dòng)物成像中起著至關(guān)重要的作用，以下將詳細(xì)闡述其對(duì)動(dòng)物成像結(jié)果的影響。一、影響成像的準(zhǔn)確性減少偽影產(chǎn)生：穩(wěn)定的熒光染料能夠持續(xù)發(fā)出較為恒定的熒光信號(hào)，避免因染料自身的不穩(wěn)定而導(dǎo)致信號(hào)強(qiáng)度的突然變化，從而減少成像中的偽影。例如，在利用近紅外熒光染料進(jìn)行生物功能長期觀察的研究中發(fā)現(xiàn)，常規(guī)的近紅外熒光染料在化學(xué)穩(wěn)定性和耐光性差時(shí)，會(huì)限制其作為熒光成像劑的應(yīng)用1。不穩(wěn)定的染料可能在成像過程中出現(xiàn)信號(hào)波動(dòng)，使得圖像難以準(zhǔn)確反映動(dòng)物體內(nèi)的真實(shí)情況，影響醫(yī)生對(duì)病情的判斷和后續(xù)***方案的制定。確保目標(biāo)定位準(zhǔn)確：對(duì)于特定的動(dòng)物組織或***成像，穩(wěn)定的熒光染料有助于準(zhǔn)確地定位目標(biāo)區(qū)域。例如在新型嗪類熒光染料用于術(shù)中神經(jīng)成像的研究中，穩(wěn)定的熒光染料YQN-3在臂叢神經(jīng)和坐骨神經(jīng)中顯示出高特異性神經(jīng)靶向信號(hào)，能夠精細(xì)定位并識(shí)別出喉返神經(jīng)，從而在術(shù)中保留這些神經(jīng)的完整性48。如果熒光染料不穩(wěn)定，可能會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)定位不準(zhǔn)確，增加手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)和難度。

神經(jīng)特異性熒光染料：噁嗪類熒光染料YQN-3能夠精細(xì)定位并識(shí)別出動(dòng)物（大鼠）的喉返神經(jīng)，從而在術(shù)中保留這些神經(jīng)的完整性8。這表明該類熒光染料對(duì)特定的神經(jīng)組織具有較高的特異性。良好的穩(wěn)定性可以確保在動(dòng)物成像過程中始終保持對(duì)特定神經(jīng)部位的準(zhǔn)確識(shí)別和定位，為手術(shù)操作提供可靠的指導(dǎo)。如果穩(wěn)定性不佳，可能會(huì)導(dǎo)致成像部位的特異性降低，出現(xiàn)錯(cuò)誤定位或無法清晰顯示目標(biāo)神經(jīng)的情況。熒光染料標(biāo)記的氧化鐵磁性納米顆粒（MNP）：使用雙重?zé)晒馊玖蠘?biāo)記的MNP，其中附著在**（DY-730）上的染料在小鼠施用后的一天，其熒光在肝臟和脾臟中較為突出，但此后的時(shí)間點(diǎn)不明顯。相反，在體內(nèi)粘附到PEG涂層上的染料Dy-555的熒光較為穩(wěn)定14。這說明不同部位的熒光染料穩(wěn)定性差異會(huì)影響對(duì)特定***（如肝臟和脾臟）的成像特異性。穩(wěn)定性好的染料能夠更準(zhǔn)確地反映目標(biāo)***的情況，而穩(wěn)定性差的染料可能會(huì)導(dǎo)致成像結(jié)果的不確定性，影響對(duì)動(dòng)物體內(nèi)特定部位的準(zhǔn)確判斷。南京星葉生物熒光染料標(biāo)記蛋白。

第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料，**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺，具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢，因此后者不常使用。與DAPI相似，此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值，在無結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細(xì)胞滲透作用，因此可用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞。與DAPI不同是，Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細(xì)胞膜。在細(xì)胞培養(yǎng)中，因?yàn)樵撊旧珓o法進(jìn)入完好的細(xì)胞內(nèi)，所以常常被用來區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑，但對(duì)不同的堿基沒有特異性。在核酸結(jié)合態(tài)下，其比較大激發(fā)波長為538nm，比較高發(fā)射波長為617nm。未結(jié)合狀態(tài)下碘化丙啶的比較大激發(fā)和發(fā)射被移到較短的波長和較弱的強(qiáng)度。它也可以在不改變其熒光特性的情況下與RNA結(jié)合。要區(qū)分DNA和RNA，必須使用足夠的聚合酶。異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機(jī)熒光染料，目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。上海水溶熒光染料

Super Flour 系列在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。遼寧生物發(fā)光熒光染料

Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右，它的熒光肉眼觀察很明亮，并且對(duì)pH不敏感，在共聚焦顯微鏡中可以用532nm（肩峰）或者556nm（頂峰）的激光束激發(fā)，在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察，所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核，所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時(shí)，Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標(biāo)記蛋白，抗體，多肽等，它常見的使用是標(biāo)記核酸分子（DNA和RNA）。基于熒光圖譜的相似性，Cy3可以被TAMRA，TRITC, BODIPY TMR等染料替代，在需要更明亮，更穩(wěn)定的替代物時(shí)，可以考慮使用AF547或者AF555等。遼寧生物發(fā)光熒光染料