數(shù)字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值，不受擴(kuò)增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù)，能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。

       數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中，使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個(gè)單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增，然后再對每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。

線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級，靈敏度高達(dá)萬分之一。杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

       CNV（Copy Number Variations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP) 的數(shù)目，計(jì)算比值，直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。

       除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待，而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上，已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。

杭州微滴式數(shù)字PCR簡介FAM、VIC雙通道熒光檢測。

無創(chuàng)產(chǎn)前檢查

       鐮狀細(xì)胞貧血（sickle cell anemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴(yán)重的危害，可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結(jié)果顯示，dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí)，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當(dāng)厲害了。

       數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術(shù)，能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù)，是對起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù)，將*****的RNA逆轉(zhuǎn)錄及數(shù)字PCR擴(kuò)增整合到一個(gè)反應(yīng)體系，單管雙檢同時(shí)測定*****的兩個(gè)**基因，消除***變異帶來的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。

       MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測設(shè)備，此系統(tǒng)檢測無需依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可達(dá)到***定量，具有超高靈敏度，檢測靈敏度高達(dá)1個(gè)拷貝，且具有較好的重復(fù)性，降低同樣本不同批次的檢測差異。數(shù)字PCR結(jié)果采取終點(diǎn)判讀法，相比熒光定量PCR的過程性讀取可有效降低對PCR 擴(kuò)增效率的依賴、降低PCR***物對檢測結(jié)果的影響，對于復(fù)雜樣本也能提供穩(wěn)定的檢測結(jié)果等特點(diǎn)，在******臨床實(shí)驗(yàn)及***患者的治療過程中可發(fā)揮重要作用。 高靈敏度——數(shù)字PCR的靈敏度與同體積反應(yīng)體系的分割份數(shù)成正比。

定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn)：

1. 在20多年的使用和發(fā)展中，定量PCR作為一種技術(shù)平臺，已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù)，在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上，定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?；A(chǔ)研究方面，則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。   

2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中，基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成，綜合各種因素來看，眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。   

3. 上述的“各種因素”具體展開，主要包括：通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻(xiàn)與protocol的數(shù)目等等。   

4. 就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看，定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢，意味著同一個(gè)run內(nèi)可對各種表達(dá)豐度的樣品進(jìn)行分析。

液體活檢：早篩、用藥、監(jiān)測、復(fù)發(fā)。杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

產(chǎn)品特點(diǎn)

       無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)核酸的***定量。

       全封閉防污染設(shè)計(jì)，一鍵式自動化操作。

       采用主流可靠的解決方案，系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成，并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等

       微滴生成采用油包水乳化微滴技術(shù)，在微管道中利用氣壓驅(qū)動，2mins生成高達(dá)10萬個(gè)皮升級的微滴，高效高產(chǎn)，支持多重?cái)?shù)字PCR的開發(fā)。

       微滴生成芯片為高精度微流控芯片設(shè)計(jì)，三維微納防污染結(jié)構(gòu)，一張芯片可同時(shí)處理8個(gè)樣本。

       微滴檢測使用雙通道熒光，支持EvaGreen染料法及探針法。

       檢測線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級，基因突變檢測靈敏度高達(dá)0.01%。

       檢測通量高，可一次檢測高達(dá)96個(gè)樣本，支持靈活設(shè)定。

       全中文分析軟件，人性化界面設(shè)置，多種分析工具供用戶選擇。

       本系統(tǒng)為開放式平臺，可使用第三方PCR反應(yīng)液，支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。

杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應(yīng)國內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商，致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。

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公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括：等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí)，公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

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