數(shù)字PCR可以直接計(jì)算目標(biāo)序列的拷貝數(shù),因此無需依賴于對(duì)照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進(jìn)行精確的***定量檢測(cè);此外,由于數(shù)字PCR在進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí) 判斷有/無兩種擴(kuò)增狀態(tài),因此也不需要檢測(cè)熒光信號(hào)與設(shè)定閾值線的交點(diǎn),完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴(kuò)增效率的影響**降低,對(duì)PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競(jìng)爭(zhēng)性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測(cè)稀有突變。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,歡迎您的來電哦!廣東藥品數(shù)字PCR銷售
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR是具有國內(nèi)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的第三代JUE對(duì)定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測(cè)儀以及結(jié)果數(shù)據(jù)分析設(shè)備等構(gòu)成。系統(tǒng)通過自主設(shè)計(jì)的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時(shí)間內(nèi)將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個(gè)體系為的PCR反應(yīng)體系,體積約為0.2nL,單次實(shí)驗(yàn)一次可生成8個(gè)樣本的油包水體系 。由于油包水體系的分割效應(yīng),使得數(shù)字PCR受PCRYi制物的影響相對(duì)較小,有利于復(fù)雜環(huán)境樣本的實(shí)驗(yàn)操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數(shù)字PCR結(jié)果判讀為終點(diǎn)法,故其對(duì)PCR擴(kuò)增效率的依賴也相對(duì)較小。廣東藥品數(shù)字PCR銷售浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,有需求可以來電咨詢!
研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對(duì)于低豐度目標(biāo)序列的檢測(cè),定量PCR、雜交、毛細(xì)管測(cè)序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測(cè)靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測(cè)中Ct值大于33的情況下,其重復(fù)性就不是很高),而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來,從而提高了檢測(cè)的靈敏度及重復(fù)性。此外,由于樣品微滴化處理的同時(shí),也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對(duì)于***劑的耐受程度,因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對(duì)**核酸標(biāo)記物的檢測(cè)。一般而言,毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測(cè)靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測(cè)下限為0.001%。
在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問題,究竟是相對(duì)定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測(cè)定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司,歡迎新老客戶來電!
與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):1、能夠完全定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行完全定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測(cè)很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,明顯降低了背景信號(hào)和yìzhì物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有需要可以聯(lián)系我司哦!福建小型數(shù)字PCR供應(yīng)商
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個(gè)體化診療通過檢測(cè)T790M位點(diǎn)突變情況,可以更好地評(píng)估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺(tái)ARMS檢測(cè)技術(shù)的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測(cè)到T790M突變。這個(gè)時(shí)候dPCR技 術(shù)展現(xiàn)出了 的檢測(cè)精度,此外,dPCR***定量的優(yōu)勢(shì)也能充分發(fā)揮出來了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.)基因表達(dá)分析伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML)患者延長(zhǎng)生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對(duì)CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果檢測(cè)下限可以達(dá)到0.001%,顯示出dPCR在痕量核酸檢測(cè)方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢(shì)廣東藥品數(shù)字PCR銷售