相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進(jìn)行***定量,直 接獨(dú)處DNA分子的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測:終點(diǎn)PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴(kuò)增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行***定量,如動(dòng)血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來電!河北芯片數(shù)字PCR代理商
MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn):1、JUE對定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本;4、一鍵式自動(dòng)操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計(jì)數(shù)器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達(dá)到10^9;7、 知識產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計(jì)算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動(dòng)或手動(dòng)完成,每個(gè)樣本可單獨(dú)設(shè)定閾值線;輸出數(shù)據(jù)圖標(biāo)、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動(dòng)識別復(fù)雜微滴分簇四簇;軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能,支持陽性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計(jì)及這些指標(biāo)的任意組合;單個(gè)樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測系統(tǒng),配以獨(dú)特的軟件系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個(gè)樣本,操作靈活;河北芯片數(shù)字PCR代理商數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,歡迎新老客戶來電!
個(gè)體化診療通過檢測T790M位點(diǎn)突變情況,可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測到T790M突變。這個(gè)時(shí)候dPCR技 術(shù)展現(xiàn)出了 的檢測精度,此外,dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.)基因表達(dá)分析伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML)患者延長生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測定,結(jié)果檢測下限可以達(dá)到0.001%,顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢
同時(shí),從公式也可以看出,隨著反應(yīng)陽性體系數(shù)(X)的增加,體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)相對于X會有較大的差距,隨著X的持續(xù)增加,數(shù)字PCR結(jié)果的不確定度也隨著提高,總體來說,數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個(gè)方面,N的增加會使整個(gè)數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍,并可以提高反應(yīng)的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復(fù)性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情況下,增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。商業(yè)化dPCR平臺及其特點(diǎn)發(fā)展到現(xiàn)在,市面上常見的dPCR主要有兩種:微滴式dPCR(dropletdPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chipdPCR,cdPCR)技術(shù)。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高,目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認(rèn)可??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司,歡迎新老客戶來電!
CNV(CopyNumberVariations,拷貝數(shù)變異)研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異,測序方法適用于高于30%的變異率檢測,而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數(shù)字PCR通過直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因(拷貝數(shù)為1的基因,例如RNaseP)的數(shù)目, 計(jì)算比值,直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。除此之外,dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待,而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上,已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來電咨詢!河北芯片數(shù)字PCR代理商
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數(shù)字PCR采用的策略概括起來非常簡單,就是“分而治之”(divideandconquer)[1],這種做法非常類似于計(jì)算機(jī)科學(xué)中的“分治算法”,將一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)分配到大量微小的反應(yīng)器中,在每個(gè)反應(yīng)器中包含或不包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的目標(biāo)分子(DNA模板),實(shí)現(xiàn)“單分子模板PCR擴(kuò)增”,擴(kuò)增結(jié)束后,通過陽性反應(yīng)器的數(shù)目“數(shù)出”目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。在實(shí)際的數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中,事實(shí)上是通過呈現(xiàn)兩種信號類型的反應(yīng)器比例和數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)算出原始樣本中的模板拷貝數(shù)。河北芯片數(shù)字PCR代理商