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來源: 發(fā)布時間:2023-09-20

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢:1、能夠完全定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準曲線和擴增動力學(xué)影響,可進行完全定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個 PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應(yīng)體系中,明顯降低了背景信號和yìzhì物對反應(yīng)的干擾,擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR的公司。河南小型數(shù)字PCR商家

數(shù)字PCR

MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點:1、JUE對定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設(shè)計的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時處理1-8個樣本;4、一鍵式自動操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計數(shù)器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達到10^9;7、 知識產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動或手動完成,每個樣本可單獨設(shè)定閾值線;輸出數(shù)據(jù)圖標(biāo)、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動識別復(fù)雜微滴分簇四簇;軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能,支持陽性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計及這些指標(biāo)的任意組合;單個樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測系統(tǒng),配以獨特的軟件系統(tǒng),可以實現(xiàn)高達20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個樣本,操作靈活;河南小型數(shù)字PCR商家數(shù)字PCR,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需求可以來電數(shù)字PCR!

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數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段,于20世紀由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個反應(yīng)單元中有一個或沒有核酸。利用PCR擴增的同時,加入可檢測熒光。待擴增結(jié)束時,使用統(tǒng)計學(xué)方法采集每個反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度?;诜忠悍绞降牟煌?,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。

微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后,逐個對每個微滴進行檢測,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢不依賴Ct值或內(nèi)參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本,且更實用。檢測數(shù)量一次可達96個樣品。

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研究方向無創(chuàng)產(chǎn)前篩查無創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關(guān)遺傳疾病)。目前標(biāo)本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統(tǒng)獨特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉(zhuǎn)基 因食品或成分的檢測目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標(biāo)準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標(biāo)準品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標(biāo)準物質(zhì)的定標(biāo)工作。河南小型數(shù)字PCR商家

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