研究方向*****的實時監(jiān)控已有數(shù)篇文章報道了使用數(shù)字PCR技術(shù)對患者***過程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進行檢測,實時監(jiān)控疾病進展。在非小細胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結(jié)果。與影像學(xué)及其他常規(guī)指標(biāo)相比,ctDNA突變及豐度改變通常會提前數(shù)月出現(xiàn),這樣就可以提醒醫(yī)生及時調(diào)整***方案,使患者得到更有效的***。隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標(biāo)檢測的成熟,數(shù)字PCR將會進入更多應(yīng)用領(lǐng)域,有力推動生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、檢驗檢疫、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的快速發(fā)展。采用有限稀釋的方法將目標(biāo)分子分割到**的反應(yīng)體系中。杭州微滴式數(shù)字PCR價格
在定量PCR時,我們常常糾結(jié)一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因為數(shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。廣州MicroDrop-100數(shù)字PCR原理檢測數(shù)量一次可達96個樣品。
無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)H BB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時,可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當(dāng)厲害了。
dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個核酸分子模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號,沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標(biāo)分子存在于單個液滴中的可能性。國內(nèi)擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。
產(chǎn)品特點無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實現(xiàn)核酸的***定量。全封閉防污染設(shè)計,一鍵式自動化操作。采用主流可靠的解決方案,系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術(shù),在微管道中利用氣壓驅(qū)動,2mins生成高達10萬個皮升級的微滴,高效高產(chǎn),支持多重數(shù)字PCR的開發(fā)。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設(shè)計,三維微納防污染結(jié)構(gòu),一張芯片可同時處理8個樣本。微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測線性范圍達到6個數(shù)量級,基因突變檢測靈敏度高達0.01%。檢測通量高,可一次檢測高達96個樣本,支持靈活設(shè)定。全中文分析軟件,人性化界面設(shè)置,多種分析工具供用戶選擇。本系統(tǒng)為開放式平臺,可使用第三方PCR反應(yīng)液,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。動物源性的檢測分析。常州流式數(shù)字PCR如何選型
2個光電倍增管(PMT),靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD。杭州微滴式數(shù)字PCR價格
數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標(biāo)分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。杭州微滴式數(shù)字PCR價格
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