要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制，務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么?；?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段：

指數(shù)期

       每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍（假定 ** 反應(yīng)效率）。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增，因?yàn)樗性噭┚迈r可用，反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應(yīng)繼續(xù)，一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開(kāi)始減緩，并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。

平臺(tái)期（終點(diǎn)：使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)）

       反應(yīng)停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物，并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng)，PCR 產(chǎn)物將開(kāi)始降解。因?yàn)槊總€(gè)樣品具有不同的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，所以每支試管或每個(gè)反應(yīng)將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺(tái)期。在平臺(tái)期可以看到這些差異。在平臺(tái)期內(nèi)，傳統(tǒng) PCR 進(jìn)行測(cè)量，又稱為終點(diǎn)檢測(cè)。 樣本多樣性，樣本通量可達(dá)96個(gè)樣本，支持靈活設(shè)定。南京JUE對(duì)定量數(shù)字PCR解決方案

**個(gè)體化診療

通過(guò)檢測(cè)T790M位點(diǎn)突變情況，可以更好地評(píng)估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺(tái)ARMS檢測(cè)技術(shù)的靈敏度有限，沒(méi)有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測(cè)到T790M突變。這個(gè)時(shí)候dPCR技術(shù)展現(xiàn)出了****的檢測(cè)精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢(shì)也能充分發(fā)揮出來(lái)了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。

2.）基因表達(dá)分析

伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML）患者延長(zhǎng)生存期，但是臨床上發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對(duì)CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果檢測(cè)下限可以達(dá)到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測(cè)方面比qPCR具有無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì) 深圳廣州永諾數(shù)字PCR簡(jiǎn)介雙通道熒光檢測(cè)，支持EvaGreen染料及探針?lè)ā?/p>

MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點(diǎn)：

一、適應(yīng)性廣，靈活性高

1、理論上可覆蓋qPCR（熒光定量PCR)的所有應(yīng)用

2、樣本多樣性，樣本通量可達(dá)96個(gè)樣本，支持靈活設(shè)定

3、開(kāi)放式平臺(tái)，支持用戶自行開(kāi)發(fā)試劑、產(chǎn)品。

二、靈敏度高，準(zhǔn)確性高

1、***定量——無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線

2、采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個(gè)的微滴

3、線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí)，靈敏度高達(dá)萬(wàn)分之一

三、可分析復(fù)雜混合物

1、準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率

2、雙通道熒光檢測(cè)，支持EvaGreen染料及探針?lè)?/span>

3、支持多重?cái)?shù)字PCR

四、操作簡(jiǎn)單，使用方便

1、全封閉防污染設(shè)計(jì)，一鍵式自動(dòng)化操作。

2、可選全中文分析軟件

       數(shù)字PCR檢測(cè)及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來(lái)了，但是無(wú)奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來(lái)完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結(jié)果分析對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)也十分枯燥與繁瑣，因此在很長(zhǎng)一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來(lái)由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過(guò)程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題，推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。

       目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片；第二種是使用微反應(yīng)室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中，每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增之后，有一個(gè)核酸分子的模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào)，沒(méi)有模板的反應(yīng)器沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積，可以推算出原始溶液的核酸濃度。 準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率。

MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn)：

1、JUE對(duì)定量，結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線；

2、突破局限，檢測(cè)靈敏度可低至萬(wàn)分之一；

3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片，單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本；

4、一鍵式自動(dòng)操作，20uL PCR體系可生成100,000微滴，8個(gè)樣本單次微滴生成*需2分鐘；

5、FAM、HEX（VIC）雙熒光通道，半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光源相比LED光源，穩(wěn)定性高，功率穩(wěn)定不影響檢測(cè)靈敏度，單色性能優(yōu)異降低對(duì)檢測(cè)特異性的影響，且方向性好；

6、檢測(cè)器為2個(gè)光電倍增管，靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計(jì)數(shù)器，增益為10^5，光電倍增管增益可以達(dá)到10^9；

7、**知識(shí)產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計(jì)算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度，CNV 值，突變豐度；閾值線可自動(dòng)或手動(dòng)完成，每個(gè)樣本可單獨(dú)設(shè)定閾值線；輸出數(shù)據(jù)圖標(biāo)、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等；軟件可自動(dòng)識(shí)別復(fù)雜微滴分簇四簇；軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能，支持陽(yáng)性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計(jì)及這些指標(biāo)的任意組合；單個(gè)樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測(cè)系統(tǒng)，配以獨(dú)特的軟件系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)20重的PCR分析；

8、單次檢測(cè)通量96個(gè)樣本，操作靈活； FAM、VIC雙通道熒光檢測(cè)。無(wú)錫微滴式數(shù)字PCR現(xiàn)貨

單細(xì)胞研究：測(cè)序、PCR。南京JUE對(duì)定量數(shù)字PCR解決方案

       CNV（Copy Number Variations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測(cè)序方法適用于高于30%的變異率檢測(cè)，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過(guò)直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP) 的數(shù)目，計(jì)算比值，直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。

       除此之外，dPCR在病原微生物檢測(cè)、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測(cè)序文庫(kù)的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測(cè)、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待，而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測(cè)等具體的應(yīng)用方向上，已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。

南京JUE對(duì)定量數(shù)字PCR解決方案

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應(yīng)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商，致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來(lái)，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測(cè)院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。

浚和在不斷引進(jìn)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí)，結(jié)合行業(yè)和市場(chǎng)需求，加強(qiáng)和客戶之間的溝通，并與國(guó)際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系，不定期地與合作商進(jìn)行技術(shù)交流，努力加強(qiáng)自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員，依靠雄厚的技術(shù)實(shí)力、科學(xué)合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù)，得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品包括：等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測(cè)定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí)，公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

浚和儀器將始終以行業(yè)特點(diǎn)為立足點(diǎn)，以客戶需求為導(dǎo)向，不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力，不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶共同進(jìn)步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。