要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制，務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么?；?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段：

指數(shù)期

       每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍（假定 ** 反應(yīng)效率）。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增，因?yàn)樗性噭┚迈r可用，反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應(yīng)繼續(xù)，一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開(kāi)始減緩，并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。

平臺(tái)期（終點(diǎn)：使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)）

       反應(yīng)停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物，并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng)，PCR 產(chǎn)物將開(kāi)始降解。因?yàn)槊總€(gè)樣品具有不同的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，所以每支試管或每個(gè)反應(yīng)將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺(tái)期。在平臺(tái)期可以看到這些差異。在平臺(tái)期內(nèi)，傳統(tǒng) PCR 進(jìn)行測(cè)量，又稱(chēng)為終點(diǎn)檢測(cè)。 準(zhǔn)確的定量結(jié)果和優(yōu)異的重復(fù)性。杭州國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR銷(xiāo)售電話

定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn)：

1. 在20多年的使用和發(fā)展中，定量PCR作為一種技術(shù)平臺(tái)，已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù)，在工業(yè)界和分子檢測(cè)的某些應(yīng)用上，定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?；A(chǔ)研究方面，則形成了被稱(chēng)為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。   

2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中，基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成，綜合各種因素來(lái)看，眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。   

3. 上述的“各種因素”具體展開(kāi)，主要包括：通量、自動(dòng)化程度、各種檢測(cè)探針與染料、檢測(cè)通道、成本和可參考文獻(xiàn)與protocol的數(shù)目等等。   

4. 就目前市場(chǎng)上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來(lái)看，定量PCR在檢測(cè)的線性范圍上具有優(yōu)勢(shì)，意味著同一個(gè)run內(nèi)可對(duì)各種表達(dá)豐度的樣品進(jìn)行分析。

研究方向

       低豐度及稀有序列的精確定量

       目前對(duì)于低豐度目標(biāo)序列的檢測(cè)，定量PCR、雜交、毛細(xì)管測(cè)序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾，使得檢測(cè)靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測(cè)中Ct值大于33的情況下，其重復(fù)性就不是很高)， 而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過(guò)**的微滴  化處理，使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來(lái)，從而提高了檢測(cè)的靈敏度及重復(fù)性。

       此外，由于樣品微滴化處理的同時(shí)，也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝，提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對(duì)于***劑的耐受程度，因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對(duì)**核酸標(biāo)記物的檢測(cè)。一般而言，毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測(cè)靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測(cè)下限為0.001%。

       微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴，其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后，逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè)，有熒光信號(hào)的微滴判讀為1，沒(méi)有熒光信號(hào)的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽(yáng)性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。

與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢(shì)

       不依賴(lài)Ct值或內(nèi)參基因，即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本，且更實(shí)用。

雙通道熒光檢測(cè)，支持EvaGreen染料及探針?lè)ā?/p>

研究方向

無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查

       無(wú)創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷, 如21號(hào)染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測(cè)或已知父母基因型的其它核酸病檢測(cè)(孟德?tīng)栂嚓P(guān)遺傳疾病)。目前標(biāo)本來(lái)源主要為血液，而待檢測(cè)的胎兒DNA受到母體DNA的干擾，影響了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。而QX200檢測(cè)系統(tǒng)獨(dú)特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測(cè)序法的補(bǔ)充來(lái)進(jìn)行的無(wú)創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷，從而提高工作效率及節(jié)約成本。

轉(zhuǎn)基因食品或成分的檢測(cè)

       目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時(shí)采取定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線法，這種方法需要依賴(lài)于已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定標(biāo)工作。 20微升體系生成100,000微滴。上海廣東數(shù)字PCR解決方案

MicroDrop?數(shù)字PCR可廣泛應(yīng)用于科研、醫(yī)療、出入境檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域。杭州國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR銷(xiāo)售電話

       我國(guó)***擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份，打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。永諾生物依以微滴式數(shù)字PCR儀為**，打造了全自動(dòng)液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創(chuàng)新產(chǎn)品，致力于解決**、***領(lǐng)域的精細(xì)診斷這是國(guó)內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測(cè)系統(tǒng)，能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域，未來(lái)，采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。杭州國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR銷(xiāo)售電話

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應(yīng)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專(zhuān)業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商，致力于為客戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)的定制化解決方案。多年來(lái)，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測(cè)院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)的服務(wù)。

浚和在不斷引進(jìn)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí)，結(jié)合行業(yè)和市場(chǎng)需求，加強(qiáng)和客戶(hù)之間的溝通，并與國(guó)際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系，不定期地與合作商進(jìn)行技術(shù)交流，努力加強(qiáng)自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員，依靠雄厚的技術(shù)實(shí)力、科學(xué)合理的配置方案、專(zhuān)業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù)，得到了廣大用戶(hù)的支持與信賴(lài)。

公司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品包括：等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測(cè)定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí)，公司還提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)，如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

浚和儀器將始終以行業(yè)特點(diǎn)為立足點(diǎn)，以客戶(hù)需求為導(dǎo)向，不斷地提高自身專(zhuān)業(yè)技術(shù)能力，不停地完善客戶(hù)服務(wù)質(zhì)量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶(hù)共同進(jìn)步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。