數(shù)字PCR的應(yīng)用

檢驗(yàn)檢疫 食品安全

?轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)（國(guó)標(biāo)）

?病原菌鑒定

?動(dòng)物源性檢測(cè)分析

科研

?基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)

?CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證

?甲基化含量鑒定

?單細(xì)胞研究：測(cè)序、PCR

臨床

?**液體活檢：早篩、用藥、監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā)

?無創(chuàng)產(chǎn)前篩查：低成本、快速

?***性疾?。篐BV、HIV定量

       據(jù)悉，MiniDrop?**團(tuán)隊(duì)由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科交叉領(lǐng)域的**組成，依托精密儀器研發(fā)、生物納米材料與分子生物學(xué)等平臺(tái)，以微滴式數(shù)字PCR儀為**，打造了全自動(dòng)液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創(chuàng)新產(chǎn)品，致力于解決**、***領(lǐng)域的精細(xì)診斷。

雙通道熒光檢測(cè)，支持EvaGreen染料及探針法。南京微滴式數(shù)字PCR正規(guī)代理

       數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術(shù)，能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù)，是對(duì)起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù)，將*****的RNA逆轉(zhuǎn)錄及數(shù)字PCR擴(kuò)增整合到一個(gè)反應(yīng)體系，單管雙檢同時(shí)測(cè)定*****的兩個(gè)**基因，消除***變異帶來的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。

       MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測(cè)設(shè)備，此系統(tǒng)檢測(cè)無需依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可達(dá)到***定量，具有超高靈敏度，檢測(cè)靈敏度高達(dá)1個(gè)拷貝，且具有較好的重復(fù)性，降低同樣本不同批次的檢測(cè)差異。數(shù)字PCR結(jié)果采取終點(diǎn)判讀法，相比熒光定量PCR的過程性讀取可有效降低對(duì)PCR 擴(kuò)增效率的依賴、降低PCR***物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，對(duì)于復(fù)雜樣本也能提供穩(wěn)定的檢測(cè)結(jié)果等特點(diǎn)，在******臨床實(shí)驗(yàn)及***患者的治療過程中可發(fā)揮重要作用。 南通JUE對(duì)定量數(shù)字PCR全封閉防污染設(shè)計(jì)，一鍵式自動(dòng)化操作。

定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn)：

       5. 目前定量PCR已經(jīng)能實(shí)現(xiàn)高通量樣品條件下的自動(dòng)化操作。   

       6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量，可以徹底擺脫對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù)，提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性，甚至能用來對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定標(biāo)。   

       7. 基于***定量的方式，數(shù)字PCR結(jié)果的高重復(fù)性和高精度可實(shí)現(xiàn)微小差異的基因表達(dá)分析，如等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、microRNA表達(dá)分析等等。所謂“微小差異”的標(biāo)準(zhǔn)一般而言是指表達(dá)水平的差異在2倍以內(nèi)。   

       8. 同等條件下，數(shù)字PCR在靈敏度方面擁有優(yōu)勢(shì)，使得該技術(shù)已成為**的液態(tài)活檢、病原微生物檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因成分測(cè)定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術(shù)。

dPCR的基本原理

       目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中，每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后，有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào)，沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度?？梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細(xì)管，油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計(jì)不同分子的數(shù)量，根據(jù)泊松分布的原理，反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計(jì)算，從而解決了多個(gè)目標(biāo)分子存在于單個(gè)液滴中的可能性。 FAM、VIC雙通道熒光檢測(cè)。

       數(shù)字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值，不受擴(kuò)增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù)，能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。

       數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中，使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增，然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。

全封閉體系，自動(dòng)化流程操作。南通JUE對(duì)定量數(shù)字PCR

可使用第三方PCR反應(yīng)液，配備PCR A300（溫度范圍4°C-98°C，擴(kuò)增模塊溫控精度±0.2°C）。南京微滴式數(shù)字PCR正規(guī)代理

無創(chuàng)產(chǎn)前檢查

       鐮狀細(xì)胞貧血（sickle cell anemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴(yán)重的危害，可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結(jié)果顯示，dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí)，可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3]，可以說是相當(dāng)厲害了。

南京微滴式數(shù)字PCR正規(guī)代理

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應(yīng)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商，致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測(cè)院等多個(gè)行業(yè)提供先進(jìn)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。

浚和在不斷引進(jìn)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)儀器設(shè)備的同時(shí)，結(jié)合行業(yè)和市場(chǎng)需求，加強(qiáng)和客戶之間的溝通，并與國(guó)際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系，不定期地與合作商進(jìn)行技術(shù)交流，努力加強(qiáng)自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員，依靠雄厚的技術(shù)實(shí)力、科學(xué)合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù)，得到了廣大用戶的支持與信賴。

公司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品包括：等離子清洗機(jī)、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機(jī)、水分測(cè)定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等，目前主要合作品牌有：日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時(shí)，公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，如設(shè)備的維護(hù)、驗(yàn)證等。

浚和儀器將始終以行業(yè)特點(diǎn)為立足點(diǎn)，以客戶需求為導(dǎo)向，不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力，不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶共同進(jìn)步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。