CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對(duì)促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。上海計(jì)數(shù)精子分析VCL

美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。香港水生動(dòng)物精子分析重復(fù)性高IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點(diǎn)，能夠捕捉到微小的細(xì)節(jié)和變化，進(jìn)一步提高了精子分析的準(zhǔn)確性。

全自動(dòng)的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出?？梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜?fù)的載玻片，深度從10um～100um。每次分析捕捉100幀圖像，掃描速度每秒60幀。**的軟件升級(jí)。  

IVOS能提供：精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析，在60Hz下半秒掃描30幀，為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。 [1]主要功能IVOS自動(dòng)精子活動(dòng)、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。Hamilton Thorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域，成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)?？梢詰?yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。

精子分析儀工作原理

以灰度識(shí)別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù)，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù)，對(duì)采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析，由計(jì)算機(jī)處理后，打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對(duì)1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測 [1]。

優(yōu)點(diǎn)：

操作簡便，用量少，檢測速度快，重復(fù)性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級(jí)等，還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。

缺點(diǎn)：

影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計(jì)數(shù)池的相對(duì)準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。 精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率。

五、精子活動(dòng)力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子＞0.80：**后120分鐘內(nèi)活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子＞0.60；**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動(dòng)。[臨床意義]活動(dòng)不良或不活動(dòng)的精子增多，是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***，某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等，也可使精子活動(dòng)力下降。六、精子計(jì)數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1．精子計(jì)數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常，見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2．精液多次未查到精子為無精癥，主要見于睪丸生精功能低下，先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個(gè)月后精液中應(yīng)無精子，否則說明手術(shù)失敗。3．老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。該設(shè)備還支持多種分析模式，包括精子濃度、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測量，滿足用戶的多樣化需求。廣州快速運(yùn)動(dòng)精子分析WOB

精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海計(jì)數(shù)精子分析VCL

擴(kuò)展性檢查：可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊(cè)增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān)，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容，已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊(cè)增加了大量篇幅對(duì)其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上，越來越多的人意識(shí)到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對(duì)于男性不育的影響，泌尿男科醫(yī)生可能提出對(duì)精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評(píng)估。本手冊(cè)納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。上海計(jì)數(shù)精子分析VCL