外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對(duì)外泌體的干擾),請(qǐng)參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費(fèi),不亦樂乎?您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?南京濃縮管代理價(jià)
多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對(duì)在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液青浦區(qū)默克4ml超濾濃縮管批發(fā)益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會(huì)透過,因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達(dá)到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對(duì)于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時(shí)可以完成對(duì)溶質(zhì)的除鹽。超濾的應(yīng)用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質(zhì)粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達(dá)到99%以上。
用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上,膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留?;旌系? 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實(shí) 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間,則可達(dá)到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋,低壓下操作也有助于達(dá)到更好的效果。超濾濃縮管直銷公司。
這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對(duì)蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評(píng)估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。超濾濃縮管服務(wù)電話是多少呢。奉賢區(qū)默克超濾濃縮管代理價(jià)格
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