如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。超濾濃縮管的系列有很多。金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管咨詢報價
特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液楊浦區(qū)默克離心濃縮管報價超濾濃縮管應用領(lǐng)域你知道嗎。
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *
這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標準化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!
操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現(xiàn)在,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。長寧區(qū)Merck超濾濃縮管代理價格
你知道超濾濃縮管的用途嗎?金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管咨詢報價
特點與優(yōu)點: 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,沒有死體積,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實際應用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等。金山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管咨詢報價