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來源: 發(fā)布時間:2021-12-27

胎牛血清是細胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代,它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養(yǎng)。因此,如何在使用過程中保護這些因子的活性,達到較為大的細胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面:正確儲存,避免反復(fù)凍融:血清在-20°C凍存。血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進行分裝。血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。連云港去外泌體胎牛血清

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未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會對人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險。此外,不合格的血清對實驗的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實性也會造成嚴重影響。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對細胞培養(yǎng)的實驗結(jié)果會造成嚴重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性;血清批次不穩(wěn)定,實驗結(jié)果難以重復(fù)。連云港去外泌體胎牛血清血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。

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國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產(chǎn)生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關(guān)于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據(jù)實驗設(shè)計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成完全培養(yǎng)基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據(jù)自己的實驗來確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費。

多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。

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血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。胎牛血清的其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚。連云港去外泌體胎牛血清

血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。連云港去外泌體胎牛血清

胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為:胎牛血清:胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺后,通過一系列工藝處理較為終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。新生牛血清:出生14小時內(nèi)未進食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。小牛血清:出生后3天至6月齡小牛動脈分離血清。成年牛血清指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。連云港去外泌體胎牛血清

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