避免產(chǎn)生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。莆田OriCell胎牛血清供應(yīng)商
那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清;應(yīng)選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細(xì)胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細(xì)胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細(xì)胞看不出太明顯的變化,但長期的話細(xì)胞會衰老得較快,從而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重影響。微生物:微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝可以對細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴(yán)格控制牛腹瀉、牛細(xì)小、藍(lán)舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區(qū)生產(chǎn)還可避免朊病毒。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清銷售公司血清對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶。
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么?取血年齡不同:牛血清按照牛取血時間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常以此稱)的指的是出生4-6小時,且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛,有時還稱作國產(chǎn)新生牛。 新生牛血清指的是出生14天-3個月進(jìn)行取血的牛。成年牛血清指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因?yàn)榕Q酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。組分與比例不同:這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,所以IgG含量低。用途與用法不同:根據(jù)細(xì)胞所需生長條件可確定。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁。
血清的安全風(fēng)險因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學(xué)趨勢、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當(dāng)可以預(yù)防能避免的動物疾病,同時產(chǎn)地國穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施,對保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn),生產(chǎn)遵循cGMP指南,則可保證血清質(zhì)量,降低有關(guān)無菌過濾、摻加和標(biāo)簽錯誤的風(fēng)險。cGMP為現(xiàn)場審核的開展提供了框架。生產(chǎn)過程中對血清進(jìn)行有效的無菌過濾也是十分重要的。產(chǎn)品質(zhì)控,有效的無菌過濾使得細(xì)菌污染的風(fēng)險很低。對于支原體和病毒篩查,一些相關(guān)規(guī)范內(nèi)部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進(jìn)行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時使得要篩查的病毒種類無需太多。有效輻照,要進(jìn)一步降低外源因子風(fēng)險,可對血清進(jìn)行輻照(25–40 kGy)。但輻照并不能保證病毒污染的完全去除。輻照過量會導(dǎo)致FBS效能下降。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫(yī)治中起重要作用。福州優(yōu)等胎牛血清供應(yīng)商
每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。莆田OriCell胎牛血清供應(yīng)商
未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會對人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險。此外,不合格的血清對實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實(shí)性也會造成嚴(yán)重影響。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會造成嚴(yán)重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴(yán)重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性;血清批次不穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)。莆田OriCell胎牛血清供應(yīng)商