選購FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)?產(chǎn)品檢測,每款FBS在生產(chǎn)上市之前,必須經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測指標(biāo)包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細(xì)菌、病毒等,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。質(zhì)量驗(yàn)證我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實(shí)、健康地生長。在確保了FBS的來源真實(shí)性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質(zhì)量,即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了,而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。胎牛血清應(yīng)用比較普遍。合肥標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
為什么要熱滅活胎牛血清?胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。開啟的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,開啟淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活胎牛血清。為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)少量沉淀?胎牛血清沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。連云港標(biāo)準(zhǔn)級血清報價血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中。
胎牛血清的功能:胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞倪^濾膜。胎牛血清含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及Hormone類物質(zhì)。
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質(zhì)會比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。回憶一下,細(xì)胞復(fù)蘇時,要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時間會稍有出入)。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基。優(yōu)等血清
胎牛血清起到為細(xì)胞提供營養(yǎng)、支持、保護(hù)的作用。合肥標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
如何區(qū)別真假胎牛血清:外觀,拿到血清,較先接觸的是血清外觀,對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,外觀的判斷尤為重要,顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的點(diǎn)很分散,大多是由屠戶采的血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿?,紅細(xì)胞容易破裂。總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量較好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活胎牛血清或保存不當(dāng)?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。合肥標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
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