胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經(jīng)超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產(chǎn)的一切環(huán)節(jié)均有嚴格的質(zhì)量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內(nèi)的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)需求。有些情況下胎牛血清結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。南京標準血清價格
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進行臍帶打結(jié)處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內(nèi)。在沒有真空泵時,也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經(jīng)過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產(chǎn)生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產(chǎn)生350mL和550mL血清。廈門優(yōu)等血清哪家好胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
胎牛血清對細胞貼壁中的作用:在細胞培養(yǎng)時,大部分來自實體組織感官的細胞會貼壁。它們在機體內(nèi)時,也是與其他細胞或者細胞外基質(zhì)結(jié)合的,貼壁對維持細胞的良好形態(tài)和促進細胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細胞,其增殖率也較高。人的造血干細胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細胞包括成纖維細胞,巨噬細胞,上皮樣細胞,脂肪細胞,它們交錯連接,構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)基中加入牛血清,對于粘附細胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細胞粘附都有促進作用。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細胞粘附的促進作用,尤其在細胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時更為明顯。
活性炭處理胎牛血清的應用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機,用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內(nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚。衢州進口胎牛血清廠家
胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml)。南京標準血清價格
胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。所有胎牛血清均在當?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協(xié)會要求。胎牛血清參與細胞培養(yǎng),是細胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細胞提供生長因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養(yǎng)。南京標準血清價格
上海司鼎生物科技有限公司主營品牌有司鼎;OriCell,發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,該公司服務型的公司。公司是一家有限責任公司(自然)企業(yè),以誠信務實的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團隊、踏實的職工隊伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務涵蓋免疫印跡(WB)技術(shù)服務,熒光定量PCR技術(shù)服務,膜片鉗電生理技術(shù)服務,在體光纖成像記錄技術(shù)服務,價格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。司鼎生物順應時代發(fā)展和市場需求,通過**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的免疫印跡(WB)技術(shù)服務,熒光定量PCR技術(shù)服務,膜片鉗電生理技術(shù)服務,在體光纖成像記錄技術(shù)服務。