胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細(xì)微差異即可決定成敗的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來說,選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關(guān)重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產(chǎn)的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導(dǎo)致的,另一方面也受到過度使用的影響。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。徐州優(yōu)級血清報價
血清的安全風(fēng)險因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學(xué)趨勢、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當(dāng)可以預(yù)防能避免的動物疾病,同時產(chǎn)地國穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施,對保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn),生產(chǎn)遵循cGMP指南,則可保證血清質(zhì)量,降低有關(guān)無菌過濾、摻加和標(biāo)簽錯誤的風(fēng)險。cGMP為現(xiàn)場審核的開展提供了框架。生產(chǎn)過程中對血清進(jìn)行有效的無菌過濾也是十分重要的。產(chǎn)品質(zhì)控,有效的無菌過濾使得細(xì)菌污染的風(fēng)險很低。對于支原體和病毒篩查,一些相關(guān)規(guī)范內(nèi)部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進(jìn)行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時使得要篩查的病毒種類無需太多。有效輻照,要進(jìn)一步降低外源因子風(fēng)險,可對血清進(jìn)行輻照(25–40 kGy)。但輻照并不能保證病毒污染的完全去除。輻照過量會導(dǎo)致FBS效能下降。揚州無外泌體血清哪里有賣胎牛血清的蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代,它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。因此,如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到較為大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面:正確儲存,避免反復(fù)凍融:血清在-20°C凍存。血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進(jìn)行分裝。血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對新買的血清進(jìn)行過濾嗎?血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1μm過濾,出廠經(jīng)過檢測并且會使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測,結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾。使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。舟山特級胎牛血清報價
胎牛血清的其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚。徐州優(yōu)級血清報價
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質(zhì)檢使胎牛血清存在生物學(xué)污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結(jié)果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導(dǎo)致采集的原血放置時間過長或操作不當(dāng)導(dǎo)致溶血,血液中血細(xì)胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,里面很多物質(zhì)都會對細(xì)胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進(jìn)行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進(jìn)行處理,較為常見的是添加、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學(xué)實驗都有巨大的影響。徐州優(yōu)級血清報價
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