一文讀懂,高效過(guò)濾器應(yīng)該多久進(jìn)行更換?
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胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過(guò)百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國(guó)外起步較早,認(rèn)識(shí)也較深入。應(yīng)該說(shuō),胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢(shì)。因?yàn)槠錉I(yíng)養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長(zhǎng),每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動(dòng),有時(shí)甚至波動(dòng)較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時(shí),要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過(guò)2000升。因此,在更換批次時(shí),要注意觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和狀態(tài)。血清指在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。溫州優(yōu)級(jí)胎牛血清
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái),便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國(guó)際通用的解方式解凍血清。南京優(yōu)等胎牛血清多少錢血清提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
血清的常見(jiàn)問(wèn)題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對(duì)新買的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎?血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾,出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè),污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。
血清的保存應(yīng)該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物明顯增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份。溫州優(yōu)級(jí)胎牛血清
經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多。溫州優(yōu)級(jí)胎牛血清
血清的主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。溫州優(yōu)級(jí)胎牛血清
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