國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產(chǎn)生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關(guān)于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據(jù)實驗設(shè)計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成完全培養(yǎng)基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據(jù)自己的實驗來確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費。血清對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶。金華進口血清哪家好
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加完全。國產(chǎn)血清因為原料供應(yīng)等原因,通常會選8個月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎牛血清。但我們知道這時血清里的生長因子已經(jīng)完全不同于胚胎發(fā)育時的生長因子。甚至于現(xiàn)在很多國產(chǎn)廠家已經(jīng)把這類血清完全歸類于胎牛血清,貼上胎牛血清的標簽,賣著胎牛價格,卻只起著新生牛的作用。市場上進口胎牛血清較多,真正好的胎牛血清并不多。廈門OriCell血清價格大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。
血清的常見問題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會對人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險。此外,不合格的血清對實驗的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實性也會造成嚴重影響。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對細胞培養(yǎng)的實驗結(jié)果會造成嚴重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性;血清批次不穩(wěn)定,實驗結(jié)果難以重復(fù)。血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚。
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。淮安優(yōu)等血清銷售公司
切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。金華進口血清哪家好
血清的安全風(fēng)險因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學(xué)趨勢、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當(dāng)可以預(yù)防能避免的動物疾病,同時產(chǎn)地國穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施,對保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn),生產(chǎn)遵循cGMP指南,則可保證血清質(zhì)量,降低有關(guān)無菌過濾、摻加和標簽錯誤的風(fēng)險。cGMP為現(xiàn)場審核的開展提供了框架。生產(chǎn)過程中對血清進行有效的無菌過濾也是十分重要的。產(chǎn)品質(zhì)控,有效的無菌過濾使得細菌污染的風(fēng)險很低。對于支原體和病毒篩查,一些相關(guān)規(guī)范內(nèi)部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時使得要篩查的病毒種類無需太多。有效輻照,要進一步降低外源因子風(fēng)險,可對血清進行輻照(25–40 kGy)。但輻照并不能保證病毒污染的完全去除。輻照過量會導(dǎo)致FBS效能下降。金華進口血清哪家好
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