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寧波優(yōu)級胎牛血清哪家好

來源: 發(fā)布時間:2022-08-02

細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎(chǔ),細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份。寧波優(yōu)級胎牛血清哪家好

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胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較為少。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體;蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。黃山特級血清瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。

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如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細胞的寶寶會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題。那么,血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì),它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。關(guān)于細胞生長,其實很多試驗以及經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng),當然血清生產(chǎn)商也是這樣說的。胎牛血清支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)大增殖濃度≥2.5×106 個/ml。

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細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):細胞生長過老,破碎的細胞殘??;血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。寧波優(yōu)級胎牛血清哪家好

胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。寧波優(yōu)級胎牛血清哪家好

因為制作工藝成熟和產(chǎn)量大的原因,實驗室常備血清一般都為牛血清。而牛血清種類也因適合培養(yǎng)不同種類的細胞分很多種了,同屬于牛血清為什么它們價格卻有天壤之別。我們就拿市面上應(yīng)用較為廣的胎牛血清和新生牛血清為例。除了生產(chǎn)成本和供應(yīng)來源不一樣外,兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可較為大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,還含有豐富的胚胎生長促進因子以及各種還未完全鑒定的成分,可滿足所培養(yǎng)細胞的特殊的代謝需求。寧波優(yōu)級胎牛血清哪家好

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