為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,XP建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預防措施與建議:因此不立即使用的血清應保存在-20℃或以下。血清指在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。徐州無外泌體血清供應商
多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。蕪湖優(yōu)等胎牛血清報價胎牛血清的細菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細胞的寶寶會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題。那么,血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì),它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。關(guān)于細胞生長,其實很多試驗以及經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng),當然血清生產(chǎn)商也是這樣說的。
胎牛血清用于細胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國外起步較早,認識也較深入。應該說,胎牛血清在細胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢。因為其營養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細胞生長,每種細胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時,要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細胞的生長和狀態(tài)。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物。
那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結(jié)果造成嚴重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴格的生產(chǎn)工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴格控制牛腹瀉、牛細小、藍舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區(qū)生產(chǎn)還可避免朊病毒。血清提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。深圳標準血清價格
胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。徐州無外泌體血清供應商
不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠。值得注意的是,胎牛血清是動物源生物制品,我國對于動物源制品的進口一直有很嚴格的規(guī)定,目前我國批準進口的胎牛血清來源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭,合法正規(guī)途徑進口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國是不允許進口的,在選購進口產(chǎn)品時,要規(guī)避選取來源為禁止輸入國家的相關(guān)產(chǎn)品。合法進口的胎牛血清需符合我國海關(guān)和檢驗檢疫部門的監(jiān)管要求,具備真實完整的進口貨物報關(guān)單和出入境檢驗檢疫入境貨物檢驗檢疫證明。選購胎牛血清時,需要核對廠家是否能提供購買批次的進口報關(guān)單和檢驗檢疫證書,烏拉圭來源的血清還必須具有出口許可證,確保產(chǎn)品來源安全可追溯。徐州無外泌體血清供應商
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