如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現(xiàn)沉淀。需要對新買的血清進行過濾嗎?血清在ISO13485認證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1μm過濾,出廠經(jīng)過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常低。通常細胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進行分析檢測,結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。血清應保存在-5℃至-20℃,然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。鎮(zhèn)江去外泌體血清價格
如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?,再放回冷凍。血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。鎮(zhèn)江去外泌體血清價格胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質檢使胎牛血清存在生物學污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導致采集的原血放置時間過長或操作不當導致溶血,血液中血細胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內產(chǎn)物,里面很多物質都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進行處理,較為常見的是添加、轉鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學實驗都有巨大的影響。
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿較為大的區(qū)別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
很好的胎牛血清:好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。國產(chǎn)血清,大多高于ph7.5,進口胎牛血清,大多低于ph7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。汕頭標準級胎牛血清供應商
血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。鎮(zhèn)江去外泌體血清價格
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。鎮(zhèn)江去外泌體血清價格