industryTemplate胎牛血清的蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。杭州細胞培養(yǎng)用血清廠家
避免產生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。衢州賽業(yè)血清哪家好胎牛血清應取自剖腹產的胎牛。
胎牛血清的合規(guī)血源產地對于細微差異即可決定成敗的細胞培養(yǎng)技術來說,選擇來源安全、品質優(yōu)良的胎牛血清至關重要。作為牛肉制品的副產品,胎牛血清的傳統(tǒng)產地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達的區(qū)域。業(yè)內通常會根據(jù)不同產地的牛情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導致的,另一方面也受到過度使用的影響。
細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老,破碎的細胞殘??;血清質量不好,反復凍融的結果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。杭州優(yōu)等胎牛血清價格
血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚。杭州細胞培養(yǎng)用血清廠家
血清為何要熱滅活,有必要對所有血清都滅活嗎?如何正確的進行滅活?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體系統(tǒng)參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中,培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅清。實驗顯示,熱滅清對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會明顯增多,不利于細胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進行滅活處理。將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不時輕度旋轉混勻血清。杭州細胞培養(yǎng)用血清廠家