為什么客戶想在他們的工作試用Genovis的FabRICATOR（IdeS）。FabRICATOR的高特異性(在鉸鏈下方有單個(gè)消化位點(diǎn))以及它對(duì)IgG種和亞類表現(xiàn)出活性的事實(shí)使其成為高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大優(yōu)勢(shì)是速度。在大多數(shù)IgG上，您可以在短短30分鐘內(nèi)生成F(ab’)2和Fc/2片段，這一速度簡(jiǎn)化了方法開發(fā)，并允許快速有效的中層表征，使客戶能夠在不比做完整質(zhì)量實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)太多的時(shí)間內(nèi)獲得更多關(guān)于分子的信息。Genovis發(fā)現(xiàn)更多的緩沖液與溶液中的FabRICATOR消解相容（更多信息）。Genovis已經(jīng)測(cè)試了PBS和150mM醋酸銨，pH7，結(jié)果良好。并且應(yīng)該也適用于FabRICATORHPLC。然而，緩沖液的離子強(qiáng)度會(huì)影響抗體片段在FabRICATORHPLC（IdeS）色譜柱上的保留，并且IgG1亞基需要至少100-150mM鹽才能洗脫為單個(gè)窄峰。其他IgG亞類或融合蛋白可能需要對(duì)緩沖液組成進(jìn)行一些優(yōu)化。Genovis的FabULOUS （SpeB） 是一種半胱氨酸蛋白酶。青海GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

在Genovis，我們的策略是幫助客戶進(jìn)行中級(jí)（或亞基）分析，這是我們的工作，特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法，我們發(fā)現(xiàn)，與簡(jiǎn)單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比，中級(jí)方法具有優(yōu)勢(shì)。通過執(zhí)行中級(jí)描述，您可以生成從完整的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)中獲得的所有信息，具有額外的優(yōu)勢(shì)。在對(duì)抗體進(jìn)行完整質(zhì)量分析時(shí)，很難明確地識(shí)別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進(jìn)，可以更有效地分析更大的分子，但通過使用我們的SmartEnzymes，如IdeS，可以將抗體分解成更小的片段，這提高了這些實(shí)驗(yàn)可以執(zhí)行的分辨率，因此，增加了鑒定修飾的信心。此外，你不僅能夠更好地識(shí)別修改，而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個(gè)結(jié)構(gòu)域，這是你在完整水平上無法做到的。陜西FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)可精確定位特定的修飾。而無需肽圖分析，可以較少的手動(dòng)操作時(shí)間快速完成。

Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對(duì)其他物種的 IgG 也有活性，包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此，F(xiàn)abRICATOR的高特異性在某些情況下會(huì)使其對(duì)鉸鏈區(qū)域的突變敏感，并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成，與 FabRICATOR 相比，F(xiàn)abRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而，小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列，并且不被 FabRICATOR Z 消化。對(duì)于這種抗體種類，F(xiàn)abULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。

與IdeS不同，Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級(jí)分析，從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級(jí)表征和質(zhì)量控制；快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F（ab'）2和Fc片段；高度特異性–人IgM重鏈中的一個(gè)消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶，可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成，并且由于酶的特異性，如果孵育時(shí)間延長(zhǎng)，則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為5.5至9.0時(shí)具有活性，不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下，但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為38kDa。FabRICATOR（IdeS蛋白酶） 的高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺(tái)方法應(yīng)用于許多不同的抗體。

大多數(shù)zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架，雙特異性或多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性，例如單價(jià)結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對(duì) Fc 糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化，這需要優(yōu)化以大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE） 在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgG1，以產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數(shù)人IgG1 上也具有活性，其中鉸鏈區(qū)域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能，我們消化了不同的人IgG1抗體，并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質(zhì)片段生成和強(qiáng)大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。IgASAP酶是獨(dú)特的酶促工具，可實(shí)現(xiàn) IgA 的中級(jí)表征和質(zhì)量控制，用于疫苗診斷的開發(fā)過程。青海FabRICATOR ZIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測(cè)為幾種變體。青海GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

抗體由于其大小和復(fù)雜性，是一種難以表征的分子。偶聯(lián)藥物有效載荷是對(duì)抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法，但進(jìn)一步增加了異質(zhì)性的復(fù)雜性和風(fēng)險(xiǎn)?？贵w藥物偶聯(lián)物 （ADC） 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進(jìn)行仔細(xì)和詳細(xì)的表征，并且需要適當(dāng)?shù)姆治龉ぷ髁鞒?。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶將ADC消化成其亞基，可以詳細(xì)表征這類復(fù)雜的藥物。Genovis的內(nèi)切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC，但降低復(fù)雜性并提高分辨率。青海GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)